典型的腺病毒载体系统如：穿梭质粒pCA13/腺病毒***组质粒pBHG11/包装细胞293细胞。pCA13/的HCMV IE启动子－多克1隆位点－SV40 AN（poly A）构成外源***的表达盒，该表达盒的插入使腺病毒E1***缺失，但是保留其两端侧翼序列（左侧的1~3bp的ITR，右侧从3.5kb到末端的维持病毒装配和活力必须的蛋白IX的***），也保留了腺病毒的包装信号

φ（194~358bp）；pBHG11则保留了腺病毒***组的绝大部分，但是缺失了包装信号φ、0.5~3.7图距（mu）部分的E1区、77.5～86.2mu的E3区，293细胞是整合有Ad5 E1***的人胚shen细胞系。pBHG11因为缺失包装信号及E1区而不能copy，pCA13带有包装信号及E1的侧翼序列，但是缺失E1区及腺病毒绝大部分***组，同样不能copy。外源目的***插入pCA13后，与pBHG11共转染，进入293细胞。pCA13与pBHG11在细胞内发生同源重组，同时，293细胞提供E1蛋白，从而包装产生腺病毒颗粒。该病毒的蛋白质外壳同野1生型腺病毒相似，具有同样的感1染力进入靶1细胞的能力，但是***组DNA的E1区被外源目的***取代，即进入靶1细胞后病毒不能copy，但可以表达目的蛋白。

   转1***技术是伴随着对生物体的认识才发展起来的技术，在生物本身还未完完全全地认识的情况下进行***层次的修饰，出现预料不到的结果和不确定性与不能解释的情况是肯定的。其造成各种不确定性的来源包括:    ***从原有机体转人宿主有机体中，两者的生理的差异对终产物影响而导致的安全性问题。

    转移的***结构的稳定性。确保经遗传修改的生物已获得要表达良性性状所需的***小DNA部分片段，由于DNA结构的稳定有助于性状表达的稳定，额外的DNA部分片段可能导致***沉默或终产物的表达不稳定，甚至产生不需要的性状或***物质。    ***插人受体***组的位置和拷贝数的不确定性。无论是农杆1菌介导法、***枪法、花粉管通道法、PEG介导电1击法等，质粒在进人宿主***组的位置与数量均是不确定的，目的***的表达量难以预料，同一批的转1***材料可能存在差异。

    转1***载体引起的不确定性。食用具抗生1素耐药性的选择性标识***可能会影响人的抗病能力。Netherwood等分别让7个肠道炎的和12个健康的志愿者食用添加转1***大豆(EPSPS)的汉堡和豆奶昔，虽然在12个健康个体的粪便中没有发现转1***，但在7个肠道炎志愿者的xiao肠中都发现了转1***，其中的3个出现有转1***向肠道微生物转移的现象，即有可能抗生1素标记会转移到肠道微生物上。

***导入细胞常用方法

转染

　 重组的噬菌体DNA也可象质粒DNA的方式进入宿主菌，即宿主菌先经过C***2，电穿孔等处理成感受态***再接受DNA，进入感受态***的噬菌体DNA可以同样copy和繁殖，这种方式称为转染（transfection）。M13噬菌体DNA导入大肠杆1菌就常用转染的方法。重组DNA进入宿主细胞也常用转染方式。***经典的是1973年建立的磷酸钙法，其利用的基本现象是：DNA如以磷酸钙-DNA共沉淀物形式出现时，培养细胞摄取DNA的效率会显著提高。用电穿孔法处理培养的哺乳类细胞也能提高细胞摄取DNA能力，但所用外加电场的强度、电脉冲的长度等条件与处理***者都很不相同。用人工脂质膜包裹DNA，形成的脂质体可以通过与细胞膜融合而将DNA导入细胞，方法简单而有效，但缺点是有细胞毒性和血1清的不亲和性，近年来人们发现了一种更为有效的转染***－阳离子聚合物，其克服了脂质体转染***细胞毒性大，在体内易被血1清清除等缺点，具有转染效率1高，操作简单而日益受到重视。