***表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码***如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)***的表达产物是功能性RNA。
所有已知的生命,无论是真核生物(包括多细胞生物)、原核生物(***和古***)或病毒,都利用***表达来合成生命的大分子。***表达可以通过对其中的几个步骤,包括转录,RNA剪接,翻译和翻译后修饰,进行调控来实现对***表达的调控。***调控赋予细胞对结构和功能的控制,***调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。***调控也可以作为进化改变的底物,因为控制***表达的时间、位置和量可以对***在细胞或多细胞生物中的功能(作用)产生深远的影响。在遗传学中,***表达是***型产生表型的基本水平。存储在DNA中的遗传密码通过***表达得到“翻译”,并且***表达的特性产生生物体的表型。因此,***表达的调节对于生物体的发育至关重要。
***枪转化法
气动式***枪中具有代表性的是PDS-1000/He,利用由不同厚度的聚苯四甲酰亚1胺膜制成的可裂圆片来调控氦气压力。当氦气压力达到可裂圆片的临界承受压力时,可裂圆片破1裂并产生强烈的气流,使微弹载体携带微弹高速运动,遇到刚性的阻挡网,微弹载体被阻遏,而微弹利用惯性继续向前高速运动,轰击靶1细胞或***,从而携带外源***进入细胞内。***枪法不再受到受体***型的限制,又能避开原生质体再生的障碍,从而使植物的遗传转化翻开了新的一页。
***枪转化法在植物遗传转化中的应用:应用***枪法转化***早的是Klein等人在1987年将携带有***氯霉1素乙酰转移酶(cat)***的烟1草花叶病毒的RNA导入洋葱的表皮细胞,使此***得到表达。后来,随着对物理参数(如金属粒子的理化特性、DNA与金属粒子的结合和靶***特性等)、环境条件(如受体植株、外植体和靶***所适宜的温度、湿度和光照等)和生物因子(如外植体及其轰击前后的培养条件等)等的技术优化,不断完善的***枪转化技术能实现对许多受体材料的转化,包括原生质体、悬浮细胞系、愈伤***、外植体(幼穗、幼胚或成熟胚),甚至可以直接轰击转化花粉。
腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含4.7kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。
***腺病毒已知有52种,分别命名为adl~ad52,研究得详细是ad2。腺病毒***组转录产生mRNA,已知的转录单位至少有5个:EⅠ区位于病毒***组左侧,可再分成EⅠA和EⅠB,与细胞转化有关;EⅡ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的copy;EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白;EⅣ区位于ad2***组右端,受EⅡ区编码的DNA结合蛋白质调控;第5个转录单位在病毒感1染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。
腺病毒的研究简史
腺病毒对啮齿类动物有致***能力,或能转化体外培养的啮齿类动物细胞。使细胞转化只需要腺病毒***组的一部分,这些***位于***组的左端,约占整个***组的7%~10%。尽管腺病毒分布很广,但对***不出现致***性。***细胞是一类允许细胞(permissive cell),即这类细胞允许感1染入1侵的病毒在细胞内copy增殖,***后细胞裂解died而释放出大量1子代病毒。在体外培养的多种***肿1瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒,但在人的1号染色体上有adl2的整合位点,这意味着***细胞对于腺病毒也可能是非允许细胞,即这类细胞在病毒感1染后,病毒不能在细胞内copy增殖,但可整合在受感1染细胞的***组内。这些细胞被病毒转化,表型发生改变,且可在体外期地培养传代。
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