腺病毒呈无囊膜的球形结构,其病毒粒子在感1染的细胞核内常呈晶格状排列,每个病毒颗粒包含一个36 kb的线性双链DNA,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-pea,t ITR), ITR的内侧为病毒包装信号,是病毒包装所需要的顺式作用元件。***组包含早期表达的与腺病毒copy相关的E1~E4***和晚期表达的与腺病毒颗粒组装相关的L1~L5***。

线状双股DNA与核心蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯,被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称,由252个直径8~10 nm的壳粒组成,壳粒排列在三角形的面上,每边6个,其中240个为六邻体(非顶点壳粒) ,另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体,三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底,塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4,基底包含两个区域P1、P2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血1清型的标准,它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分,是病毒体对免1疫选择压力***敏感的部位。

每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77. 5 nm的纤维突起,这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出,纤维顶端形成头节区,纤突有血1清特异性,且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决***点。

PCR核酸检测实验室布局建设

核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）

1、穿戴流程：在***扩增实验室的清洁区（更衣区）或者普通实验室的洁净区，工作人员按顺序依次穿戴好一次性帽子、医1用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、防护目镜和双层乳胶手套，进入样本处理工作区域或实验室。

2、要点提示：

2.1、具备标准***扩增布局条件的实验室，应在清洁更衣区做好个人三级防护，条件有限的实验室亦可选择在一洁净的实验室中按流程穿戴好个人三级防护。

2.2、需佩戴医1用N95口罩，若无医1用N95口罩，可以考虑用普通N95/KN95口罩外加一次性外1科口罩的组合方式，但不要佩戴有呼吸阀的N95口罩。

2.3、佩戴N95口罩时需检查密闭性，通过双手按压、深呼吸、左右转头等动作严格检查口罩是否佩戴正确。

2.4、一次性防护服已具备新型冠状病毒核酸检测的防护需求，有条件时可以考虑加穿一次性反穿隔离衣，穿衣时需由他人协助。

2.5、穿戴整齐的工作人员，应按要求尽快进入样本处理的实验区域开展工作，严禁穿戴三级防护后再进入普通实验区域或办公区域。

   转1***技术是伴随着对生物体的认识才发展起来的技术，在生物本身还未完完全全地认识的情况下进行***层次的修饰，出现预料不到的结果和不确定性与不能解释的情况是肯定的。其造成各种不确定性的来源包括:    ***从原有机体转人宿主有机体中，两者的生理的差异对终产物影响而导致的安全性问题。

    转移的***结构的稳定性。确保经遗传修改的生物已获得要表达良性性状所需的***小DNA部分片段，由于DNA结构的稳定有助于性状表达的稳定，额外的DNA部分片段可能导致***沉默或终产物的表达不稳定，甚至产生不需要的性状或***物质。    ***插人受体***组的位置和拷贝数的不确定性。无论是农杆1菌介导法、***枪法、花粉管通道法、PEG介导电1击法等，质粒在进人宿主***组的位置与数量均是不确定的，目的***的表达量难以预料，同一批的转1***材料可能存在差异。

    转1***载体引起的不确定性。食用具抗生1素耐药性的选择性标识***可能会影响人的抗病能力。Netherwood等分别让7个肠道炎的和12个健康的志愿者食用添加转1***大豆(EPSPS)的汉堡和豆奶昔，虽然在12个健康个体的粪便中没有发现转1***，但在7个肠道炎志愿者的xiao肠中都发现了转1***，其中的3个出现有转1***向肠道微生物转移的现象，即有可能抗生1素标记会转移到肠道微生物上。

***导入细胞常用方法

转染

　 重组的噬菌体DNA也可象质粒DNA的方式进入宿主菌，即宿主菌先经过C***2，电穿孔等处理成感受态***再接受DNA，进入感受态***的噬菌体DNA可以同样copy和繁殖，这种方式称为转染（transfection）。M13噬菌体DNA导入大肠杆1菌就常用转染的方法。重组DNA进入宿主细胞也常用转染方式。***经典的是1973年建立的磷酸钙法，其利用的基本现象是：DNA如以磷酸钙-DNA共沉淀物形式出现时，培养细胞摄取DNA的效率会显著提高。用电穿孔法处理培养的哺乳类细胞也能提高细胞摄取DNA能力，但所用外加电场的强度、电脉冲的长度等条件与处理***者都很不相同。用人工脂质膜包裹DNA，形成的脂质体可以通过与细胞膜融合而将DNA导入细胞，方法简单而有效，但缺点是有细胞毒性和血1清的不亲和性，近年来人们发现了一种更为有效的转染***－阳离子聚合物，其克服了脂质体转染***细胞毒性大，在体内易被血1清清除等缺点，具有转染效率1高，操作简单而日益受到重视。