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作者:友名生物2021/11/19 23:26:46







***表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码***如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)***的表达产物是功能性RNA。

所有已知的生命,无论是真核生物(包括多细胞生物)、原核生物(***和古***)或病毒,都利用***表达来合成生命的大分子。***表达可以通过对其中的几个步骤,包括转录,RNA剪接,翻译和翻译后修饰,进行调控来实现对***表达的调控。***调控赋予细胞对结构和功能的控制,***调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。***调控也可以作为进化改变的底物,因为控制***表达的时间、位置和量可以对***在细胞或多细胞生物中的功能(作用)产生深远的影响。在遗传学中,***表达是***型产生表型的基本水平。存储在DNA中的遗传密码通过***表达得到“翻译”,并且***表达的特性产生生物体的表型。因此,***表达的调节对于生物体的发育至关重要。



腺病毒是如何构成的

病毒滴度滴定(***培养半数感1染量TCID 50):将分装好的病毒液接种一长满单层Hep-2细胞的96孔板,第yi列每孔加25μl病毒液,作1/lO 稀释,此后依次作倍比稀释,每稀释度接种8孔,***后一列做阴性对照.对照孔和感1染病毒孔均加入100μl维持液,置37℃ 、5%CO2 培养箱中培养。每天观察并记录出现CPE的孔数及具体时间,待细胞病变不再发展后,观察记录结果,用Reed-Muench法计算病毒滴度TCID 50。



***导入细胞常用方法

转染

  重组的噬菌体DNA也可象质粒DNA的方式进入宿主菌,即宿主菌先经过C***2,电穿孔等处理成感受态***再接受DNA,进入感受态***的噬菌体DNA可以同样copy和繁殖,这种方式称为转染(transfection)。M13噬菌体DNA导入大肠杆1菌就常用转染的方法。重组DNA进入宿主细胞也常用转染方式。***经典的是1973年建立的磷酸钙法,其利用的基本现象是:DNA如以磷酸钙-DNA共沉淀物形式出现时,培养细胞摄取DNA的效率会显著提高。用电穿孔法处理培养的哺乳类细胞也能提高细胞摄取DNA能力,但所用外加电场的强度、电脉冲的长度等条件与处理***者都很不相同。用人工脂质膜包裹DNA,形成的脂质体可以通过与细胞膜融合而将DNA导入细胞,方法简单而有效,但缺点是有细胞毒性和血1清的不亲和性,近年来人们发现了一种更为有效的转染***-阳离子聚合物,其克服了脂质体转染***细胞毒性大,在体内易被血1清清除等缺点,具有转染效率1高,操作简单而日益受到重视。



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