1.人ELISA***盒在测定时,受检标本(测定其中的antibody或抗原)与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。
2.再加入酶标记的抗原或antibody,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
3.加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
4.由于酶的催化效率很高,间接地放大了免1疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定antibody。
5.然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
如何评价和选择支原体检测***盒
1. 灵敏度。
灵敏度常用支原体***组的拷贝数或支原体菌株的CFU表示。
2. 特异性和广谱性。
质量好的***盒应检测的支原体物种越多越多,并且特异性强,即只针对支原体,不针对其他***等微生物,没有交叉反应。
3. 稳定性。
冻干粉比液体***的稳定性高。
4. 样本类型及样本处理。
一款好的***盒,会标出它适合的样本类型,也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有***PCR反应的物质,因此需要处理。
5. 对照品。
一个好的***盒,会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测PCR是否正常。如果样本含有***PCR的物质,则内控对照的条带会发生缺失。有严重支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性***,因此支原体条带越强,内控条带越弱
转移RNA
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。
tRNA一级结构具有以下特点:
①是一类单链小分子RNA,长73~95nt(共有序列76nt),沉降系数4S。
②是含稀有碱基***多的RNA,含7-15个稀有碱基(占全部碱基的15%~20%),位于非配对区。
③5′末端碱基往往是鸟piao呤。
④3'端是CCA序列,其中的腺苷酸常称为A76,其3’—OH是氨基酸结合位点。
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