五种生化***盒的研究意义

多酚氧化酶（PPO）（EC1.10.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，属于一种氧化酶，通常在铜离子存在下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

钾离子对于维持机体的正常渗透压及酸碱平衡有非常重要的作用，参与糖及蛋白代谢，保证***肌肉的正常功能。血1清钾高于5.5 mmol/L时称高血钾，高血钾可使***、肌肉应激性升高，使心肌应激性降低，导致心动过缓，血1清钾超过10 mmol/L时，可发生心室纤颤，甚至心脏在舒张期停跳。血1清钾低于3.5 mmol/L时称低血钾，低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻1痹，引起心肌应激性升高，出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此，血1清钾是常用生化测定指标。

脂肪代谢是机体内非常重要的代谢途径之一，其在细胞内的存储和利用对于维持细胞正常的能量代谢非常关键，且在细胞内环境稳态的维持上发挥着不可忽视的作用。越来越多的研究显示脂肪代谢与core的发展有着一定的关系；细胞异常增殖是所有bad core细胞的一个常见特性，在细胞异常增殖的过程中细胞膜和信号分子的形成需要更多的脂肪代谢中脂肪酸代谢和脂滴代谢的参与。

甘油三酯（TG）检测***盒（比色法），#KTB2200：用异丙1醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，Periodic acid氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与Acetylacetone缩合生成***物质，在420 nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测动物***、细胞、serum（浆）以及植物样本中甘油三酯（TG）的含量水平；而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。

游离胆固醇（FC）检测***盒（比色法），#KTB2210：胆固醇氧化酶催化游离胆固醇（FC）生成△4-胆甾烯酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物，在500 nm有吸收峰，其颜色深浅与FC含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测生物样本如动物***、细胞（***）、serum（浆）中游离胆固醇（FC）的含量水平；而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。

随着***组测序、分子生物学检测手段的快速发展，PCR和荧光定量PCR实验，正在越来越多的实验室应用。然而，PCR作为一种高灵敏度的检测手段，PCR的实验结果也容易被各种无关的外源性DNA或RNA所干扰。

PCR实验室中，很容易发生DNA的交叉污染，污染通常来自于离心管、移液器和其他试验设备产生的DNA气溶胶，或DNA溶液污染桌面，或吸样枪不慎将样品或模板核酸吸入枪内。据估算，一个气溶胶颗粒可含48000个DNA拷贝。 因此，为保证PCR试验的数据准确，避免交叉污染，应定期对PCR实验室做DNA污染情况的监测。

【从植物材料或植物培养细胞中提取***组DNA】

① 按下表称取适量的新鲜植物材料（如选用的是冷冻干燥植物材料，则用量减半），剪成小块放入研钵中，加入液氮，待样品冷冻完全后快速、用力研磨至粉末状。研磨时应间断加入液氮以防止材料融化。

植物材料使用量 植物花、叶片10～100 mg 植物茎60～240 mg 植物根80～240 mg 植物种子80～240 mg   如选取植物的根、种子等样品时，因其***组DNA含量很低，需使用超过表格中所示的参数用量，此时请分两管进行步骤1～6的实验操作，在步骤7的操作中再将各管溶液分次加入至同一Spin Column中过滤，使各管的***组DNA结合到同一个Spin Column上。如从培养的植物细胞中提取***组DNA，请离心收集2×103～1×107的培养植物细胞，加入150 μl水充分悬浮细胞后移入研钵中，加入液氮后快速、用力研磨至粉末状。

注）样品研磨应充分，否则将会严重影响***组DNA的收率。

② 将研钵移至65℃水浴，当样品粉末刚开始融化时，向研钵中加入700 μl的Solution A和1.2 μl的RNase A1，用力碾磨30秒。

③ 收集650 μl研磨好的***匀浆移至Collection Tube中。如匀浆体积不足650 μl，请补充Solution A至650 μl。65℃保温15分钟。注）处理富含纤维的根/茎等植物材料或富含淀粉、蛋白质的种子等时，可延长水浴时间至60分钟。