植株的构建是现代植物生物学非常重要的先决条件。而载体作为外源*** 进入目标植物的***组的转运者,在植株的生成方面扮演着非常重要的角色。然而 随着研究人员对多个蛋白之间关系W及多***共同控制植物生长发育研究的需要,尤其是 多蛋白的相互作用,W前的单***载体已经不能满足现在的需要。所W研究人员需要一种有效的方法来转化多***进入植物内W获得同时表达多个***的植株。
蛋白质分子伴侣(molecular chaperones)是蛋白质合成过程中形成空间结构的控制因子,广泛存在于从***到人的细胞中。分子伴侣新生肽链的折、加工租穿膜进大细胞器的转位过程中起关键作用。它们有些结合在多肽链上防止肽链降解或其侧链非特异聚集;有些则可引导某些肽链正确折叠并集合多条肽链成为较大的结构。
分子伴侣结合并稳定其靶蛋白质的能力具有特异性,并依赖于ATP水解。例如热激蛋白(heat shock protein)就是分子伴侣的一个家族。因加热时可在许多细胞中被诱导出来而得名。热激蛋白源于细胞内源性保护蛋白质。另外,分子伴侣还可以是核酸、磷脂、核糖体及一些小分子物质。
folin―酚***法(lowry法)是蛋白质测定法中较灵敏的方法之一。过去此法是应用相对广泛的一种方法,由于其***乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种***,即folin―酚***,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。folin―酚***中的磷钼酸盐―磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。