ELISA定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或antibody作出'有'或'无'的简单回答,分别用'阳性'、'阴性'表示。'阳性'表示该标本在该测定系统中有反应。'阴性'则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的***高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
在间接法和夹心法ELISA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。
多酚氧化酶(PPO)活性检测***盒(比色法),#KTB1140:多酚氧化酶(PPO)能够催化Catechol产生醌,后者在525 nm有特征光吸收,测定525 nm光吸收增加的速率进而计算多酚氧化酶(PPO)活性。该***盒适用的样本范围广泛包括serum、血浆、***、细胞、***;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
血钾(K?)检测***盒(比色法),#KTB2100:serum中钾离子(K+)与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比;通过测定其浊度来测定serum钾含量。该***盒提供了一种简单的检测方法检测serum样本中钾离子(K+)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
如何确认RNA的质量
实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估***的活力。RNA样本提取的质量直接影响***表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种:RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。
检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种:
紫外分光光度计法:
测量260nm吸收值计算RNA浓度,测量260nm/280nm吸收值的比值,用于评估RNA纯度。需要注意的是:在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。
260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。<1.9,说明有蛋白质残留;>2.1,说明RNA可能发生降解。
琼脂糖凝胶电泳:
完整的RNA通常有三条带,***亮的是28S条带,其次是18S条带,***淡的是5S条带(部分***盒提取时会过滤掉5S条带)。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。
如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利,28S的亮度在18S条带的两倍以上,我们认为RNA的质量***好。
若RNA条带出现弥散,原因可能:RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。
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