蛋白表达系统分类及优劣分析
原核蛋白表达系统既是***常用的表达系统,也是经济实惠的蛋白表达系统。原核蛋白表达系统以大肠杆1菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。
酵母蛋白表达系统以甲1醇毕赤酵母为代表,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近高等真核生物,分泌蛋白易纯化,易实现高密发酵等优点。缺点为部分蛋白产物易降解,表达量不可控。
哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统主要优点是蛋白翻译后加工机制比较接近体内的天然形式,相对容易保留生物活性,缺点是表达量通常较低,稳定细胞系建立技术难度大,生产成本高。
蛋白质二硫键异构酶
分泌蛋白需要通过在分子内或分子间形成二硫键,从而形成其天然构象。蛋白二硫键异构酶,可以催化这些二硫键的形成和异构化。PDI一方面可以通过二硫键异构酶活性促进蛋白内或蛋白间形成正确的二硫键,另一方面也可以催化某些蛋白的二硫键的水解。
在肽链分部快速折叠成蛋白质过程中,***半胱氨酸之间形成错误位置的二硫键的酶。
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