腺病毒表达

   腺病毒系统是很受欢迎的可以在任何哺乳动物细胞中有效瞬时表达的***递送平台。对于难转染的细胞，如原代或非分裂细胞，采用病毒递送外源***的方式是非常有效的选择。钟鼎生物采用293A腺病毒包装细胞系（含有腺病毒包装所必需的E1***序列，是专为生产腺病毒和进行滴度测定而建立的），用于高滴度的copy缺陷型（E1和E3缺失）腺病毒的生产，以进行外源***的表达。腺病毒感1染几乎所有的细胞类型，除了一些抗腺病毒感1染的淋巴1瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞***表达的***佳系统，它可以使转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比；不整合到染色体中，无插入致突变性。能有效进行增殖，滴度高：腺病毒系统可产生108 pfu/ml原液，浓缩后可达1010-1011 VP/ml，这一特点使它非常适用于***cure。

腺病毒是如何构成的

病毒滴度滴定（***培养半数感1染量TCID 50）：将分装好的病毒液接种一长满单层Hep-2细胞的96孔板，第yi列每孔加25μl病毒液，作1/lO 稀释，此后依次作倍比稀释，每稀释度接种8孔，***后一列做阴性对照.对照孔和感1染病毒孔均加入100μl维持液，置37℃ 、5%CO2 培养箱中培养。每天观察并记录出现CPE的孔数及具体时间，待细胞病变不再发展后，观察记录结果，用Reed-Muench法计算病毒滴度TCID 50。

腺病毒的分类

分类及自上个世纪50年***现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血1清型，其中人腺病毒有52种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群（subgroup）。***cure常用的人的2型及5型腺病毒在血1清学分类上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在单个细胞中的***组拷贝数可达104（约占细胞总DNA的10%）。病毒颗粒比较稳定，通过CsCl梯度离心可以达到1010~1011pfu/ml，满足动物实验的要求。

腺病毒防治原则

腺病毒的甲醛灭活疫1苗已被用于某些人群的预防，而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫1苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致***作用，人们对全病毒疫1苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒，可使水传播性结膜1炎爆发的***性降至***小，在作眼的检查时应严格无菌操作，对所用设备充分灭菌，也可控制流行性结膜1炎的发生。对腺病毒感1染的cure仍无有效medicine。