复合PCR(multiplex PCR)技术
在同一反应中用多组引物同时扩增几种***片段.如果***的某一区段有缺失则相应的电泳谱上这一区带就会消失。复合PCR主要用于同一病原体的分型及同时检测多种病原体、多个点突变的分子病的诊断。
重组PCR技术
重组PCR技术是在两个PCR扩增体系中,两对引物分别由其中之一在其5°-端和3-端引物上带.上一段互补的序列混合两种PCR扩增产物.经变性和复性。两组PCR产物互补序列发生粘连。其中一条重组杂合链能在PCR条件下发生聚合延伸反应,产生一个包含两个不同***的杂合***。
随机引物扩增技术(arbitrary primedPCR, AP- PCR)
AP-PCR技术通过随意设计或选择一个非特异性引物.在PCR反应体系中.首先在不严格条件下使引物与模板中许多序列通过错配而复性。如果在两条单链上相距一定距离有反向复性引物存在,则可经Taq酶的作用使引物延伸而发生DNA部分片段的扩增。经一至数轮不严格条件下的PCR循环后,再于严格条件下进行扩增。扩增的产物经DNA测序凝胶电泳分离后.经放1射性自显影或荧光显示即可得到DNA***图。AP-PCR用于肿1瘤的******、******的分离;菌1种、菌株及不同物种的鉴定;遗传作图;不同分化程度或某些不同状态下的***的***表达差异等方面的研究。
PCR技术不仅可用于基础研究,还适用于日常的临床诊断、法***调查和农业生物技术研究。这些应用要求可靠的性能、及时的灵敏度和严格的标准。因此,所使用的PCR仪和PCR***必须符合这些要求和目的。
分子诊断应用包括***检测、致***突变检测以及感1染性***检测。在法***中,利用 PCR进行人类身份鉴定是通过对特别的短串联重复序列(STR)进行扩增而区分个体的。在农业学中,PCR在食物病原体检测、育种植物***分型和 GMO测试中具有重要作用。
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