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RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链 DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,反应温度在37°C左右。
对于核酸提取技术的不同,样本裂解及核酸纯化环节不尽相同,操作繁琐程度不同,提取效率、核酸的纯度亦会不同。而复杂的操作更易导致气溶胶污染,带来风险。因此,选择合适的提取技术,对当前疫情防控至关重要。
数字PCR作为新定量技术,主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法,借助专门设备将50微升左右核酸溶液样本大量稀释后,分割成了近10万个液滴分散至芯片的微反应器或微滴中,单一液滴为***反应单元,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。
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试纸条是一款基于侧向层析技术和胶体金标记技术的即用型快速检测试纸条。该款试纸条可用于蛋白、***扩增产物(PCR,LAMP,RPA)的定性/半定量检测。研究者需要自行设计分别标记有生物素的特异性检测物(如抗原、探针)和标记有FITC的特异性检测物(如探针)。
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