冻存袋的历史起源

细胞培养技术创建于1907年，历经一个世纪磨练与升华，现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。小伙伴们要想在如今细胞培养技术广泛渗透的科学研究领域搞好科研，基础的细胞株的冷冻保存和解冻复苏技术自然不能忽视。细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。

冻存袋细胞复苏操作步骤

1.操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。

3.将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。

4.取出冷冻管，立即放入3℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。

5.取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15)，混合均匀，放入培养箱培养。取0.1m1解冻细胞悬浮液作存活测试。

6.解冻后是否立即去除冷冻保护剂，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10m1培养基之离心管内，离心 1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入培养箱培养。

冻存袋临时储罐

公开了一种细胞冻存袋样本临时储罐,储罐本体设有罐体,罐盖,冻存架储存格结构,罐体和罐盖可将储罐本体形成密封腔体,罐体顶部为密封结构,罐体顶部设有圆孔,罐盖的尺寸和圆孔的尺寸相互匹配,罐盖可覆盖在圆孔之上形成密封腔体,所述的冻存架储存格结构包括轴承,轴承底部设有底盘,底盘上设有隔板.隔板的数量为多个,多个隔板将底盘分隔为多个储存格.通过设计,缩小了盖口,减少了液氮逃逸,节省成本,冻存架放置于单独的格子里有利于冻存位置管理,达到快速取放,尤其是整体冻存架快速取放转移的目的.

冻存袋使用注意事项

1.  取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致。

2.  冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二亚砜（DMSO）对细胞不是完全，在常温下，二亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二亚砜（DMSO）选择进口产品。

3.  离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。