为什么需要冻存袋？

细胞培养的传代及日常维持过程中，在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费，而且细胞一旦离开活物开始原代培养，它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是没有限制的。

冻存袋的应用

对于需要保存5年以上的体外细胞的方法,-196°℃的深低温液氮保存简便,实用.冻存后的细胞损伤小活力高能保障患者移植后造血功能的早期***,反之则导致造血功能***的延迟甚至失败.原有的液氮罐保存方式是将装有千细胞的冻存袋放入圆筒状的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于冻存袋与圆筒状的容器形状尺寸的不匹配冷冻保存时会造成冻存袋的变形导致千细胞被挤压受损甚至消灭,且受液氮罐空间限制能冻存的数量有限.针对如何经济,较大容量的保存细胞.

冻存细胞的装置及方法

本发明的装置由细胞冻存袋;细胞冻存盒,细胞架组成,细胞冻存袋置于细胞架上,细胞架置于细胞冻存盒内.批量冻存细胞的方法:将细胞悬液装入细胞冻存袋中置于细胞架上,再将细胞架放入细胞冻存盒内;将细胞冻存盒投入液氮罐或-7O°C以下冷冻设备冷冻24小时,将细胞冻存袋取出投入液氮中或-70CI以下冷冻设备长期冻存,当需解冻细胞时,拉出细胞冻存袋放入38C-39C℃ 的温水中解冻当凝固物都融化为液体后移入无菌操作台,按无菌操作程序操作将细胞冻存袋中的细胞悬液分装入离心管中离心,弃上清液,按常规解冻细胞来操作.本发明的细胞冻存袋冻存细胞体积达50-200ml,整套装置直接投入液氮中或放入-70°C以下冷冻设备.

冻存袋使用注意事项

1.  取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致。

2.  冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二亚砜（DMSO）对细胞不是完全，在常温下，二亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二亚砜（DMSO）选择进口产品。

3.  离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。