冻存袋的作用

适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或二亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢***条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。

细胞冻存的研究

细胞培养和保种技术广泛用于生命科学研究的各个领域，如研制、人工和再生***等。冷冻保存是目前细胞长期保存的通用方法，有利于降低细胞被微生物污染和细胞之间交叉污染的风险，并且能够减少细胞因传代培养而引起的遗传变异和形态改变，避免有限细胞系出现***或转化。然而，细胞的冻存和复苏过程会对细胞造成较大损伤，降低细胞膜中的脂质含量，产生过氧化，同时影响细胞的结构和代谢途径[1-3]。

细胞冻存袋操作需要注意？

1.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。

2.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。

3.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响 细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是 10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。

冻存袋的使用注意事项

1. 如用液氮罐存放样品，包裹***的铝箔或冷冻保存管转入样本袋时，请按以下步骤进行：把样本袋（纱布袋等）放入液氮中冷冻一下，而后将液氮冷却的***放入样本袋

2. 如用广口容器液氮暂存，建议用进口高质量冻存管，油性笔标记后，样品迅速放入管中，拧紧后迅速放入液氮中。然后再转移到超低温冰箱中保存。

3．直接干冰中保存并邮寄的，建议全部用进口冻存管，油性笔标记后，样品迅速放入经干冰预冷的冻存管中，放入样品袋，埋入干冰中，密封包装后，运输。