冻存袋介绍

细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。连续培养的细胞系容易发生遗传漂变，有限细胞系终会发生***，所有培养的细胞都易受到微生物污染。已建立的细胞系是一种宝贵资源，更换细胞系成本高昂，而且耗费时间。可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。

使用冻存袋的注意事项

1、使用冻存袋储存样本时，严格要求应把冻存袋放入液氮的气相层或冰箱中保存！如果冻存袋储存于液氮液体中，液氮有一定几率会渗入冻存袋内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、冻存的样本量不要超过冻存袋要求的大工作体积。

3、用毕暂时不再使用时，应洗净并擦净活栓，在活栓处应垫一纸条，以防粘连。

细胞冻存离心问题

目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了会受压过大， 。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒***，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。