冻存袋简介

属于***器械领域,涉及一种适合细胞回输用的细胞冻存袋,即生物样品存储袋,包括:一存储袋袋体和与其逐一并排排列的2~6个第二存储袋袋体;一和第二存储袋袋体之间,以及各个第二存储袋袋体之间设置袋体间连接管路;一存储袋袋体上沿设置一输入口并通过该输入口与连接管的一端连接,生物样品经由连接管并通过输入口进入一存储袋袋体;一存储袋袋体上沿设置一取样口,各个第二存储袋袋体上沿设置第二取样口,一取样口和第二取样口用于将存储在袋体内的生物样品取出.本存储袋能够方便地用于对生物样品例如脐带血造血千细胞,血浆等处置,存储,冷冻,复苏以及直接给患者回输生物样品特别是造血细胞.

使用冻存袋的注意事项

1、使用冻存袋储存样本时，严格要求应把冻存袋放入液氮的气相层或冰箱中保存！如果冻存袋储存于液氮液体中，液氮有一定几率会渗入冻存袋内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、冻存的样本量不要超过冻存袋要求的大工作体积。

3、用毕暂时不再使用时，应洗净并擦净活栓，在活栓处应垫一纸条，以防粘连。

细胞冻存复苏方法

1.  细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。

2.  培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒温水浴箱37°C预热20min，备用。

3.  二亚砜（DMSO)在40°C冰箱中冷藏30min，备用。

4.  从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入400°C水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化。

5.  将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min）。

6.  用培养液悬液混悬沉淀细胞，调整细胞浓度，方培养箱中培养。

7.  记录复苏日期。

细胞冻存的方法

1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。

2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×106/ml，离心去上清，吸入离心管中。

3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。

4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。

5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。