吸头的灭菌
1、 如果是不可整支消毒的吸头,先用灭菌袋、锡纸或者牛皮纸等材料包装需要灭菌的部件,121℃,1bar大气压,20分钟;灭菌完毕后,在室温下完全晾干后,给活塞上油,再进行组装。
2、 如果是可整支消毒的吸头(譬如德国IKA移液器),则可以将整支移液器放置于121℃,1bar大气压,进行20分钟的整支高温高压消毒。
3、 如果有些吸头不能进行高温高压消毒,但是又需要用于某些特殊的操作,比如RNA提取等,如果担心移液器被污染影响实验结果,那么就用75%的乙醇清洗吸头的头部。 如果是用于提取RNA要用无RNase污染的75%乙醇。 注意:半支消毒的移液器不可以进行整支消毒,否则会出现读数的数字部位变色,读数不准等明显现象。 其次是UV紫外线照射灭菌 吸头是采用抗紫外线的高质量材料制作的,整支吸头可暴露在紫外线照射下进行表面消毒。
吸头浸入角度和深度
吸头浸入角度控制在倾斜20度之内,保持竖直为佳;对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。吸头浸入深度建议如下所示:
移液器规格吸头浸入深度
2L和10 L 1 mm
20L和100 L 2-3 mm
200L和1000 L 3-6 mm
5000 L和10 mL 6-10 mm
固相萃取
保留和洗脱在固相萃取中通常的方法是将固体吸附剂装在一个针筒状柱子里,使样品溶液通过吸附剂床,样品中的化固相萃取技术原理合物或通过吸附剂或保留在吸附剂上(依靠吸附剂对溶剂的相对吸附)。“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子间吸引的现象,造成当样品溶液通过吸附剂床时,分离物在吸附剂上不移动。保留是三个因素的作用:分离物、溶剂和吸附剂。所以,一个给定的分离物的保留行为在不同溶剂和吸附剂存在下是变化的。“洗脱”是一种保留在吸附剂上的分离物从吸附剂上去除的过程,这通过加入一种对分离物的吸引比吸附剂更强的溶剂来完成。
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