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作者:广州联方2022/4/21 3:09:48






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2014年左右,我在新加坡任教,遇到了许多从事各种项目研究的不同团体。就是在这里,我知道了其它牌子的质谱仪,目击了别人使用 SCIEX仪器来进行他们的研究,并取得了很多成果。回到香港后,我决定将这种技术重新进行下去,并继续我的蛋白质组研究。

根据我在新加坡的观察和感受,我知道 SCIEX的质谱系统适用于对i眼i科不同蛋白的研究。此外,我还与使用质谱系统的其他大学和实验室进行了交流,很多人称赞香港的 SCIEX团队,这使我更加相信,这家公司不仅提供质谱系统,而且还提供持续的技术支持。鉴于我之前使用其它质谱分析仪的经验,这一点对我很重要,至后我选择了 SCIEX的 TripleTOF?6600和 QTRAP?6500+系统。

很多实验室自己不使用质谱仪,而是把样品送到核i心设备平台进行测试。但是,由于设备比较繁忙,一般仪器使用者都是按标准程序去采集样品,根本不能满足特定样品类型的实验需要,在一定程度上限制了其研究工作。通过使用我们实验室的质谱仪,我发现研究结果更加深入和具有革命性。与研究蛋白质组学和近视问题的其他出版物相比。有了 SCIEX技术的支持,我们就能从质谱系统中获得理想的实验结果。我们在世界各地有很多合作,并经常将各种样品送到我们手中。为了进一步开展蛋白质组学研究,我发现 SCIEX质谱系统功能强大,非常直观,而且很容易操作。实验组的每个人都喜欢和 SCIEX团队一起工作,这对我很重要。在整合了 SCIEXCloud (云计算)的 OneOmics?项目后,我们也从中获益,从而简化了数据的分析和共享。

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敏感度是质谱的灵i魂,至适用于对微量混合物的分析,一般三重四极杆质谱仪所做的 MRM灵敏度至高,但当需要使用MS2进行谱库检索时,其化合物浓度通常会达到 ug/ml的水平,如果浓度很低,仅残留 ng/ml, MRM的灵敏度不够高,无法准确定性,怎么办?QTRAP?是 SCIEX公司在2002年推出的质谱技术 QTRAP?,可以说是非常酷的硬核技术, QTRAP?系列(Q1qLIT3,第三重质量分析器是线性离子阱 LIT),它既具有三重四极杆的功能,又具有离子阱质谱的功能,可组合使用,同时定性定量,即使浓度低于1 ng/ml,用 QTRAP生成的增强型MS2谱图,也能进行定性检索。

对完全未知物的定性分析有哪些?早些年,高精度质谱较少,而低分辨率质谱,如四极杆等,仍可通过同位素丰度比部分推算出分子式,加上前面提到的扫描模式,还有一台高精度质谱,如X500系列台式 QTOF高分辨质谱等,就更容易获得化合物元素组成,但是,这还不够,还需要配套的质谱结构解析软件和足够的结构解析软件(这里需要强调,我们强大的应用专i家团队,可以将知识传授给你,分享经验)。但是,单靠质谱学也是不够的,你可能还需要利用紫外光谱、红外光谱、核磁共i振、 X单晶衍射等技术进行协同研究。





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当前高i效液相色谱高i效液相色谱高i效液相色谱生产厂家普遍采用四元数低压梯度(在线脱气)系统,但几年前大多采用了二元高压梯度。以往,四元数低压系统通常是进口仪器的产品。我国大部分厂家采用高压混合方式,没有低压系统的应用与发展。目前国内的一些招标项目中,低压四元数的选择也比较明显。多数顾客会误认为四元数低压是进口的***技术,但实际上四元数低压是对二元高压的补充,即当相数比例变化时,二元高压不能满足分析,四元数低压则不能满足。但是,如果不同比例的流动相数小于2,包括2,二元高压梯度系统在高精度分析中具有明显的优势。就目前的价格而言,四元低压泵并不比二元高压泵低很多,但是节省的费用也很大。

高i效液相色谱四级低压梯度系统是通过单泵加梯度比例阀来实现的,因为比例阀位于泵的前面,并且每个流道的溶剂在比例阀中混合,所以在泵的前后低压下混合。在常规分析中,低压四元数梯度可满足要求。若分析样品组成复杂,重复性高,或小流量下需梯度分析,宜选用高压梯度。德国 公司引进的四元高压梯度泵,解决了流动相数量有限的问题,同时又保证了高精度分析。




在高i效液相色谱分析中,常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法***至好是***,如色谱纯化***等。当要求不太严格时,纯级甚至是分析纯的***都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法,因此,应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑,采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。

1.过滤流动相。在使用前,准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒,如果不滤除它们,泵口、柱头上的过滤器就会堵塞,从而阻塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增大,柱效降低。遇到此情况时,换用过滤过的流动相,拆开堵塞过的过滤器,浸在20%的水溶液中,用超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞。

2、流动相的脱气。在使用之前,必须先除气,以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能下降,并对检测器的信号产生较大的干扰。目前,各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下,水与混合时会产生大量的气泡,气泡会进入色谱柱和检测器中,影响分析工作的正常进行。




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