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近视是一种日益普遍的眼病,它会导致人们在观察远处物体时变得模糊。利用蛋白质组学技术,香港科学家对影响眼睛正常发育和导致近视的因素进行研究。
蛋白组学是指在特定***状态下所涉及到的大量蛋白质,并从中找到影响人类和动物正常发育的外部环境或遗传因素。香港科技大学视光学院副 利用蛋白质组学技术,对多种眼疾进行研究,特别是近i视眼。该人描述了他在实验室里如何利用 SCIEX仪器进行研究:“我大约15年前从香港理工大学毕业,拿到了博士。长期以来,我对近视的研究非常感兴趣,这是我攻读博士期间研究的***。但是在这之前,我们完全了解了蛋白质组学以及这项技术能够为我们提供更深入的信息。蛋白质组学对很多临床研究非常有用,如近视、青i光眼、黄斑变性、i感i染等。在蛋白质组学的研究中,发现新蛋白质间的相互作用可能会给带来更好的方法,因此我决定要在这方面进行一次探索。”
“眼睛是这类蛋白质组研究的理想模型,我们可以将一只病眼与一只健康的眼睛直接进行比较,因为它们的遗传模式是相同的。研究期间,曾用2- D凝胶技术来分析动物眼睛里的蛋白质,这非常耗时。但是到那时,几乎没有其他方法可供选择,对利用蛋白质组研究近视的技术几乎一无所知。另外,某些***类型(如眼液)不能使用凝胶技术,这限制了我们的工作。只是在几年之后,人们才开始从使用二维凝胶技术转向使用液相色谱-质谱法,这促使我在7年前左右购买了离子阱和MALDI-TOF质谱仪。遗憾的是,我没有时间去理解这个系统的复杂性,这使我在硬件和软件使用上遇到困难,导致蛋白质组学研究被搁置数年。但是这些都是在我接触 SCIEX之前发生的。
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什么是高i效液相色谱消耗品?它是特定机器还是机器所用的消耗品?
串联质是指利用质谱进行质量分离的质谱方法。此外,质谱-质谱法、多级质谱、二维质谱、序质谱等方法也被广泛应用。
作用:
1、诱导第i一级质谱产生的分子离子裂解,有利于研究子离子与母离子之间的关系,从而得出分子离子的结构信息。
2、从严重干扰的质谱中提取有用的数据,极大地提高了质谱检测的选择性,从而可以测定混合物中的微量物质。
高i效液相色谱的工作原理及常用类型:
高i效液相色谱的工作原理是怎样的?
柱色谱中,在重力作用下,将溶剂滴入一个装有吸附剂的色谱柱中。高i效液相色谱是一种改进的柱色谱法。当高压达到400个大气压时,泵将溶剂输送到色谱柱中。柱状吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如硅石或聚合物)制成的颗粒材料。
和柱状色谱相比,采用泵输送,既能快速分析,又能用较小的颗粒作柱填料。颗粒越小,表面积越大,通过固定相与流动相以及样品组分之间的相互作用,就能更好地实现混合物中的组分分离。一般情况下,流动相是一种溶剂的混合物(例如水,,)。
由于混合物组分与吸收剂粒间相互作用的程度不同而相互分离,在此过程中,不同组分的洗脱率不一样,造成了组分离分离。高i效液相色谱的自动化程度高,与柱色谱相比,具有较高的灵敏度。
高i效液相色谱高i效液相色谱常见类型有哪些?
其中两种至常见的高i效液相色谱为正相高i效液相色谱和反相高i效液相色谱。
正相高i效液相色谱:
柱子中填充微粒二氧化硅和非极性溶剂,如正己烷。一个典型的柱长在150到250 mm之间,其内径小于4.6毫米。由于极性化合物在极性二氧化硅表面的粘附时间较长,混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度加快。
反相高i效液相色谱:
在柱子中填充二氧化硅粒子,并对其进行改性,使长碳氢链(8~18个 C原子)附着在表面,从而达到非极性。用极性溶剂,如水、醇、甲i醇等。因为在极性溶剂和极性分子之间有很强的吸引作用,混合物中的极性化合物会更快地穿过色谱柱。在通过色谱柱时,非极性分子的速度减慢。他们对烃基的吸引主要是通过范德华分散力和疏水作用产生不同程度的吸引。其在流动相中的溶解度也较低,这有助于它们与烃基的相互作用。
反相高i效液相色谱是目前使用至广泛的高i效液相色谱技术。
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