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伴随着现代工业技术的不断创新与进步,液相色谱作为色谱研究的一种非常有效的手段,在我国工业基地得到了广泛的应用。HPLC更是分离小分子气体等有机化合物的必备仪器,而液相色谱仪凭借其、高灵敏度、高分辨率,能够适应多种分离条件,并采用固定相和流动相对有机化合物进行充分处理。所以 HPLC定性分析对于现代工业的进步和发展具有重要的作用,同时也加强了我国对、食品以及化工领域的渗透。
液相色谱在工业上的分析中,通常是由操控者对未知组进行定性分析,对已知的组别进行定量分析。本对液相色谱定性分析方法作了简要的论述和分析,努力使液相色谱的过程方法能够为 HPLC所用领域的工作提供一些帮助。HPLC定性分析方法对高沸点不易挥发、不易挥发、不易分解、分子量大的有机化合物的分析具有十分显著的效果,对工业农业中的有机化合物也有基础的分析。
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远古罗马时期,人们就知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,通过观察溶液展开所形成的同心圆环,对染料和色素进行分析。事实上,这种简单的操作已经运用了现代色谱的基本原理。
19世纪中期,德国化学家 Runge对古罗马人的这一做法进行了重大改进,使其具有很好的重复性和定量能力,使得盐溶液可以在纸上分离;此外,化学家Goppalsr-oeder也将染料和动植物色素分离在长条形纸上,这些研究标志着纸色谱法的建立,并逐渐发展成现代色谱技术。
在1903年的华沙自然科学学会生物学会会议上,俄国植物学家 Tswett提出了利用吸附原理分离植物色素的新方法,这是现代色谱学的开端。俄国植物学家 Tswett在1903年召开的华沙自然科学学会生物学会会议上发表。把碳酸钙放入直立的玻璃柱中,从顶端注入植物色素的石i油醚浸取液,再用溶剂冲洗,使溶质在柱的不同部位形成色带,首i次向人们公开展示了用色谱法提纯的色素溶液以及色谱图显示的彩色环带柱管。Tswett把这种方法命名为色谱,填充管称为固定相,冲洗剂称为流动相。
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据估计,2018年全i球质谱仪市场规模为82.59亿美元,比2017年的77.66亿美元增长6.35%。其中安捷伦质谱仪约占全i球总市场的25.64%,赛默飞占21.79%,布鲁克占20.51%,这三家几乎垄断了全i球质谱市场。
与此同时,我国质谱仪基本依赖进口,据有关资料报道,2003年我国质谱仪进口超过300台,2005年增加到950台,2007年达到1700台,2009年和2010年我国质谱仪进口量分别达到3600多台和4000多台,目前国内质谱仪的需求量也只增不减,缺口巨大,根据现有数据显示,2018年国内质谱仪的进口量分别达到3600多台和4000多台。
为何面对如此巨大的需求和市场,国产质谱仪迟迟不能成为市场的主力?其中包含着更深层的原因。我国目前开展质谱仪器硬件研究的大学和科研机构超过15家,而具有理论设计能力的科研机构不超过5家,国内质谱整机厂商多达15家,涉及离子阱质谱、氦质谱、飞行时间质谱、 ICP质谱、四极杆质谱等,但串联质谱制造厂商还没有;全i球质谱仪器种类有100多种,而国内能生产的质谱仪器有100多种;从市场占有率看,国产质谱仪器仅占3%。将一台仪器推向市场,大体上需要经历原理性设计、工程设计和建立完整的生产工艺三个过程,无论哪一个方面,我国质谱水平与国外还有不小的差距,总体来说,我们与国外大概有30~50年的差距。
美国2018年《21-羟化酶致先i天性shen上腺皮质增i生症临床应用指南》
1.3建议筛检实验室采用液相色谱-串联质谱二级筛选同时检测多种激i素,以更充分地区分 CAH的各种酶缺陷,从而提高 CAH筛查的阳性预测价值
3.2对于有症状的***,推荐使用液相色谱-串联质谱检测血i清中17羟孕酮的含量
2020年,《新生儿先i天性shen上腺皮质增i生症筛选诊断实验室检测共识》
利用LC-MS/MS技术进行 CAH二级筛选
目前还没有一种用于LC-MS/MS法 CAH二级筛选的商品化***盒,筛选中心应参照实验室自建方法(laboratory developed tests, LDT)来设置参考区间
应用质谱技术对干斑 CAH的二级筛选
在此基础上,金域***检验诊断技术体系完善,建立了临床***组中心、临床质谱检测中心、临床血i液病诊断中心、病毒诊断与转化中心、病理诊断中心等多个高新技术中心,并在此基础上构建了实验室检测技术平台,涵盖从常规到高i端的主流技术领域;借助全方i位、多元化的技术平台,以及在范围内的服务网络,金域***积累了大量的罕见病阳性i病例,其中通过质谱技术累计检测了340多万例遗传代谢病标本,检出阳性近万例。
在 CAH方面,金域***通过多技术平台整合,为临床提供整体解决方案,为提高特异性和阳性预测值,减少假阳性,避免“假阳性”所带来的一系列社会问题和临床问题,金域***还利用质谱技术建立了干血斑 CAH二级筛选方法,成功应用于临床,显著提高了 CAH的阳性预测值,真正实现 CAH的精i确诊断。
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