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电泳基本原理:
双层:
双电离子层是两相分离的表面由相对固定和游离的两部分组成。
双电离子层是异号表面的离子层,任何浸入液体中的界面都会形成双电层。对于毛细管电泳,在毛细管电泳中,其表面和壁面均存在双电层。
Zeta电位:
介电性溶液中的任何带电粒子都可以看作是双电层系统的一部分,异号的带电离子被异号的带电离子中和,异号离子中有些被不可逆的吸附到离子上,而其他离子游离在附近,扩散到电介质中进行离子交换。「定」离子有一个切面,这个切面与离得近的离子间的电位称为 Zeta电位。
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毛细管电泳中,样品分子的迁移是有效电泳浊度和电渗流清洁度的综合表现,而此时的清净度被称为表观清净。由于石英(或玻璃)毛细管表面的硅羟基解离,在大多数水溶液中都会产生一种负的定域电荷,并指向负极。毛细管中的电渗率比电泳速度大一个数量级,因此样品组分可以实现同向泳动。在电渗和电泳中,正离子的运动方向是一致的,所以它首先流出。中立分子与电渗流同速,随电渗入。负离子在中性颗粒后面流出,其运动方向与电渗方向相反。pH值与电渗流有密切关系。电渗透受 Zeta电位的影响, Zeta电位由毛细管壁表面的电荷决定,而电荷又受缓冲溶液的 pH值影响,因此电渗流的值是缓冲溶液 pH值的函数,一般随 pH值的增加而增大,到中性或碱性时值会变得很大。另外,毛细管洗涤过程、电泳缓冲液组成、粘度、温度等对管壁上解离的影响也会发生变化。电磁以及许多能与毛细管表面作用的物质,如表面活性剂、蛋白质等,对电渗流有很大影响。
电泳法作为一种伴随电泳产生的电动现象,在电泳法中起重要作用。大多数情况下,电渗流速度是电泳速度的5-7倍。毛细管电泳(CE)利用电渗流,使中性分子、正负离子向一个方向发生差速迁移,在一次 CE过程中同时完成正负离子的分离测定。电渗流的大小和方向影响着 CE分离的效率、选择性和分离程度,因而成为分离条件优化的重要参数。CE分离的重复性(迁移时间和峰面积)受电渗流的微小变化严重影响。因此,电渗流的控制是 CE的一项重要工作。控制电渗流的方法主要是改变缓冲液的组成和浓度、改变缓冲液的 pH值、添加添加剂、对毛细管内壁进行改性-物理或化学方法上涂覆及动态去活;外加径向电场;改变温度等。
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气体色谱仪在长期使用后,分流管的内径会逐渐变小,甚至堵塞。分流管阻塞后,进样口出现异常压力、峰形变差,分析结果异常。分流管是否存在堵塞,在检修过程中,不管是否提前判断分流管是否堵塞,都需要清理。对分流管道的清洗一般选用、等,对于堵塞严重的分流管道,用单纯的清洗方法很难清洗干净,需要采用其它辅助机械方法来完成。可选用粗细合适的钢丝对分流管道进行简单疏通,再用、等清洗。对于手动分流式气相色谱仪,由于事先不容易对分流器的情况做出准确的判断,因此在检修时对分流管进行清洗是非常必要的。
在 EPC控制的气相色谱分流器中,由于长期使用,存在着将一些微小进样垫屑进入 EPC与气体管道的接触面,易造成 EPC部分的堵塞或引起进样压力变化。因此每一次大修时,尽量对仪器的 EPC部分进行检查,并用、等清洗,然后烘干处理。
进样口外随时可能因进样等原因形成部分有机物冷凝,可用脱脂棉蘸取、等有机物对进样口进行初步擦拭,然后对擦不掉的有机物先用机械方法去除,注意在去除固化有机物的过程中一定要小心操作,不要对仪器设备构件造成损害。在去除了冷凝的有机物之后,使用仔细擦拭仪器部件。
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