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用不同的方法对色谱柱会有不同的要求,但是每一种色谱柱都有其清洁要求,这在色谱柱上可以找到,必须按照以上的要求来进行,否则会导致色谱柱效下降,色谱柱的使用寿命缩短,检测波长会因品种的不同而有不同的要求,这里需要指出的是要注意观察检测器灯能量的变化,如基线波动大,活性成分的响应值突然变小等,对检测器电镜能量的变化,要注意观察到检测器中能量的变化,如基线波动大,活性成分的响应值突然变小等,有可能是由于灯的能量不足导致的,所以实际使用时要根据实际情况更换。流动速度也因品种而异,一般为1.0 ml/min,流速不能随意改变,尤其作为 QC人员,但作为研发人员,有时为了摸索条件或进行方法耐用性验证,会改变流速来评估该方法的适用性。对不同品种的进样量也有不同的规定,进样量这个现在都是自动进样,所以进样精密度都是很好的,不用特别强调。
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操作员:,作为液相操作人员,必须认真学习夜想说明书,掌握液相硬件和软件的操作,掌握日常维护,掌握基本故障的排除与维修。普通液相的操作规程也是由操作人员起草的,因此只要严格按照操作要求操作,一般都不会出现问题,当然对液相的日常维护维护来说,特别是对液相的日常维护***来说,要注意的是液相的日常维护***,泵密封垫的清洗、系统的清洗、溶剂过滤头的清洗等方面都不会出现问题,尤其是对液相的日常维护,不会造成不必要的麻烦。第二,操作者在配制液相分析样品时,好由同一人单独完成,以免不必要的意外误差。4、液体安装环境:仪表应尽量安装在水平位置,远离振动、电磁干扰的屋内,有条件时尽量把液相数据处理系统分开,一方面是防止色谱基线噪声太大、基线不稳等,一方面是为了减少对***的危害。
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固相萃取柱:固相萃取是一种应用广泛、广受欢迎的样品前处理技术,它是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附、与样品基体及干扰物分离,再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离富集目标化合物的目的。这种方法是在传统的液-液萃取基础上,结合目前广泛使用的液相色谱和气相色谱固定相的基础知识,利用物质相似作用的相似相溶原理开发出来。
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固相萃取柱提取工艺:
在样品提取前,要用一整管溶剂冲洗试管,以润湿固相萃取柱填料。反相型硅胶和非极性吸附介质,通常用水溶性有机i溶剂如甲i醇预处理,然后用水或缓冲溶液。在甲i醇湿吸附剂的表面和渗透性结合的烷i基相上,使硅胶表面的润湿效率更高。有时候预处理溶剂在甲i醇之前使用。这类溶剂通常和洗脱溶剂类似,主要用于去除固相萃取管中的杂质,以及它们对分析物的干扰,也可能是只溶于强洗脱溶剂。
正相型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常对样品所在的有机i溶剂进行预处理。在样品加入去离子水或低浓度的离子缓冲溶液中进行预处理,在非极性有机i溶剂中使用离子交换填料,在样品加入前应保证萃取柱保持湿润。样品加入前,在萃取柱中干燥填充后,重复进行预处理过程。再引入有机i溶剂前,用水冲洗缓冲液中的盐份。
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固体萃取柱的应用:
单纯固相萃取可以手工完成,即在固相萃取柱的上端连接一个注i射器,萃取柱通过挤压将萃取柱中的液体排出。此外,也可采用正压力或负压力的固相萃取设备对批量样品进行固相萃取。伴随着技术的发展,样品量的不断增加,越来越多的分析实验室开始采用自动固相萃取仪,尤其是多通道固相萃取仪。
固相萃取仪是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附到样品基体和干扰物,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附达到分离目标化合物的目的(即样品的分离、纯化和浓缩),旨在减少样品基质的干扰,提高检测灵敏度,其应用于各种食品安全检测、农产品残留监测、医i药卫生、环境保护、商品检验、自来水及化工实验室。
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