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坡度洗脱的流动相选择不当要注意溶剂的溶解性，不相容性溶剂不能作为梯度洗脱的流动相。部分溶剂混溶于一定比例，超过一定范围后就不能互溶，使用时更要注意。同时，在与缓冲溶液混合时，也会发生与缓冲剂混合，在使用过程中需要特别注意。不计空白梯度洗脱为保证良好的重复性，梯度洗脱的溶剂纯度要求较高。由于弱溶剂中的杂质在色谱柱上被强溶剂洗脱，在分析样品之前，必须对样品进行空白梯度洗脱，识别溶剂杂质峰。分级洗脱溶剂需要完全脱气，以防止在混合过程中产生气泡。没有考虑溶剂混合引起的粘度变化由于混合溶剂的粘度随组分而变化，因此，在梯度洗脱过程中常常会发生压力变化。比如，和水的粘度都比较小，当它们以相似比例混合时，粘度增加很大，这时的柱压比或水为流动相时大一倍。所以在梯度洗脱时要注意防止压力超过输液泵或色谱柱可以承受的大压力。

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六通阀的正确使用与维护①样品进样前，要用0.45μ的滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。②旋转阀芯时不要太慢，不要停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力急剧上升，甚至超过了泵的大压力；再转到进样位置，过高的压力会使柱头损坏。③为了防止进样阀内的缓冲盐及样品残留，每次分析结束后应冲洗进样阀。一般可采用清水冲洗，或先用溶样溶剂冲洗，再用清水冲洗。

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峰丢失的故障

导致漏峰的原因主要有两种：一是气路中的污染，二是气路未分离。

情况可以通过多次空转和清洗气路(进样口、检测器等)来解决。

1、为减少对气路的污染，可采取如下措施：程序升温后阶段，应进行高温清洗；

2、样品进样应保持清洁；

3、减少使用高沸点油类物质；

4、采用尽可能高的进样口温度、柱温和检测器温度。

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峰丢失的第二种情况是峰未分开，除上述原因外，还有可能是由于系统污染引起的柱效下降或柱子老化引起，而柱子的老化所造成的峰损失则是渐进的、缓慢的。

系统污染和漏气是造成假峰现象的主要原因，通过检查漏气、除污等措施加以解决。日常工作中应记录正常时基线的情况，以便维修时参考。

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固相萃取柱填料：

固相萃取填料通常是色谱吸附剂，可以分为三大类：第i一类是以硅胶为基质(如C18、C8等)；第二类是聚苯乙i烯-二乙烯苯等无机材料，如聚苯乙i烯-二乙烯苯等；另一类是以硅藻土、氧化铝、石墨化碳等为主要原料。

固相萃取柱容量：

柱的容量必须考虑到固相萃取柱的选择。因为我们所面对的样品基体往往比较复杂，如食物、生物样品等。固相萃取中，固相萃取吸附剂吸附目标化合物的同时，也吸附类似性质的杂质。所以在考虑柱容量时，应是总目标化合物加可吸附杂质含量不能超过柱容量。反之，可能会有部分目标化合物在载样过程中不能被吸附，导致回收率较低。

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固体萃取柱的用途：

大多数的固相萃取都是通过人工来完成的，即在固相萃取柱的上端连接一个注i射器，在注i射器的挤压下萃取柱中的液体被挤出。此外，也可采用正压力或负压力的固相萃取设备对批量样品进行固相萃取。伴随着技术的发展，样品量的不断增加，越来越多的分析实验室开始采用自动固相萃取仪，尤其是多通道固相萃取仪。