取无水冰醋酸（按含水量计算，每1水加醋酐5.22mL)750mL，加入（70%-72%）8.5mL，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐23mL，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。随着生物技术的进步，柠檬酸工业有了突飞猛进的发展，全世界柠檬酸产量已达0.4Mt。在柠檬酸发酵技术领域，由于高产菌株的应用和新技术的不断开拓，柠檬酸发酵和提取收率都有明显提高。

从结构上讲柠檬酸是一种三羧酸类化合物，并因此而与其他羧酸有相似的物理和化学性质。加热至175°C时它会分解产生二氧化碳和水，剩余一些白色晶体。柠檬酸是一种较强的有机酸，有３个Ｈ＋可以电离；加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。在工业，食品业，化妆业等具有用途。

柠檬酸是有机弱酸，呈弱酸性。柠檬酸主要用做酸味剂，有非常诱人而且不那么刺激的酸味，大量用于饮料、蜜饯、糖果等带有酸甜味的食品。柠檬酸和柠檬酸钠的作用并不存在很大差别，主要用于食品的酸度调节的。柠檬酸是一种重要的有机酸，又名枸橼酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。