ELISA***盒的分类
检测***及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性。
ELISA***盒的应用领域
ELISA法是诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的病种等方面的诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于流行病学调查。本法不仅可以用来测定,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物***各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:
1、酶染色各种细胞内成份的***。
2、研究抗酶的合成。
3、显现微量的沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或成份。
ELISA***盒检测过程中的注意事项
ELISA实验通用规则
Elisa***盒——Elisa实验常见问题及解决方案
显色淡,灵敏度偏低
1 ***盒未充分平衡 ***盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有***已平衡至室温(约25℃)
2 样品不适合做ELISA检测 样品一般选择培养上清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分)
3 酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥
4 包被遭到*** 操作温和,移液枪不能碰到孔底
5 样本和孵育条件不合适 按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。
6 洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间;
7 偶联HRP***污染 弃去***,重新配置
8 错误的稀释偶联HRP*** 弃去***,重新配置
9 TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间:人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色;S4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65
10 样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数,确认样本稀释倍数。
11 滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。
12 酶标板不适合做ELISA 不能使用细胞培养板,建议使用ELISA高吸附力板子。
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