亲和柱的应用

应用：牛奶中M1的测定

（参考方法GB 541337-2010 食品安***家标准 乳和乳制品中M1 的测定）

样品前处理

称取50g牛奶到具塞离心管中，在水浴中加热到35-37℃，4000转离心15min，除去上层乳脂，全部样品待过柱净化

样品过柱净化

1. 将亲和柱（SBHL-20-0245）连接于10ml或50ml***管下。

2. 将处理好的样品全部通过亲和柱，控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。（注意：空气不能通过柱体）

3. 以稳定的流速淋洗柱子两次，弃去全部流出液，并使2mL-3mL空气通过柱体。

4. 洗脱，流速为1mL/min-2mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。

亲和柱性能介绍

亲和柱是利用了酶联的原理，净化效果好，同时有富集作用。

净化柱就是溶液从柱子过一下，利用里面的填料吸附一些杂质物质，达到一定的净化目的，不能富集。

亲和柱的填料全是采用高特异性的***，符合******检测的国际标准，回收率大于95%. 可用于饲料，食品等复杂样品的检测。

以上内容由北京中检维康生物技术有限公司为您提供，希望对同行业的朋友有所帮助！

亲和柱——亲和层析的原理

通常，在开始亲和层析前需要预***行全细胞提取物的粗制，例如细胞裂解液，生长培养基。

首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中，其中含有某类特定的生物大分子（从DNA到蛋白质，取决于实验需求）。等待一段时间使两相充分混合，随后将洗涤缓冲液倒入色谱柱中。洗涤缓冲液通过***非目标生物分子与固定相的较弱结合来去除非目标生物分子。目标生物分子对固定相具有较高的亲和力，因此能够保持与固定相的结合，而不会被洗涤缓冲液冲走。然后将洗脱缓冲液倒入含有剩余目标生物分子的色谱柱中。洗脱缓冲液比洗涤缓冲液，能够从更大程度上减弱靶生物分子与固定相之间的相互作用，从而洗脱靶生物分子。洗脱得到的溶液包含洗脱缓冲液和目标分子，称为洗脱液。

固定相一般是凝胶基质，常见的有琼脂糖。为了防止目标分子与配体结合过程中的空间干扰或重叠，首先将含有烃链的***连接到琼脂糖珠（固体支持物）上。这种具有烃链的***通常被称为琼脂糖珠和靶分子之间的间隔基。