ELISA***盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应,所以任何的诊断剂离不开好的原料,如抗原,酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原,而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的,而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用***工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定***几成为现实的新一代***,各种新型使用的测定方法也不断出现。
ELISA***盒的试验原理
***盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的***同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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ELISA***盒检测过程中的注意事项
ELISA实验通用规则
Elisa***盒操作步骤
1、固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
2、包被或抗原的挑选:将或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。
3、 酶标记作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法',在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
4、酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。
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