正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱
固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。
固相萃取柱和液相色谱柱的比较
两者本质上是不同的东西,固相萃取柱是用来做固相萃取用的,主要作用是过滤和富集样品,而液相色谱柱是液相色谱上使用的,用来分析样品的。
固相萃取柱是样品处理的时候用的,液相色谱柱是仪器上的一个配件相当于,机子不可或缺的一部分,使组分分开才进检测器检测的。
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固相萃取柱的选择
选择合适的萃取柱一般从两方面进行考量:吸附剂和柱规格的选择。适宜的吸附填料可以让干扰物质与目标组分得到良好的分离,并满足回收要求。而吸附剂所能吸附的化合物质量是有限的,一旦样品量过大,则会出现“超载”,使得目标物直接“穿透”萃取柱不被保留。
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固相萃取柱的使用步骤
步骤一:预处理萃取柱。
在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性溶剂预处理,然后用水或缓冲溶液。湿润吸附剂表面和渗透键合烷,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样,是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。
步骤二:加入样品。
将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
步骤三:冲洗填料。
用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。
步骤四:洗脱感兴趣的化合物。
用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。
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