你对亲和柱了解多少?
亲和柱可以应对不同复杂的样品基质,实现样品中目标的有效回收,回收率总体保持理想。
亲和柱中含有特异性紧密附着在载体上,这些可以与样品中的特异性结合,保存在亲和柱中,进一步洗脱可以得到待检测的。适用于浓缩和纯化粮食、坚果或者牛奶等复杂基质中的样品的提纯。
主要应用于赭曲,呕吐和玉米赤等的提取和净化。
双酚A检测新方法——亲和柱净化-液相色谱法
双酚A,也称BPA,在工业上被用来合成聚碳酸酯(PC)和环氧树脂等材料。许多科学家发现,双酚A会发挥类似雌素的作用扰乱***内的代谢过程。。我国、欧盟、美国等都禁止其用于婴***奶瓶。但目前对于双酚A的检测前处理仅有少量文献报道,均采用简单的萃取、浓缩或SPE固相萃取柱净化。中检维康研发团队将专一性强、稳定性高的层析技术应用于双酚A检测,力图简化样品前处理,提高检测灵敏度及净化效果。
双酚A亲和柱能够特异性的纯化样品中的双酚A,将样品溶液通过亲和柱时,双酚A键合在亲和柱中的上。用蒸馏水将杂质淋洗去除。将净化、浓缩后的双酚A从上分离下来。然后,注入HPLC或LC-MS进行测定。
亲和柱亲和层析过程中的注意事项
1、上样
亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等,以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。
2、洗脱
亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种:特异性洗脱和非特异性洗脱。
亲和柱——亲和层析介绍
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。
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