固相萃取柱的原理
SPE技术基于液-固相色谱理论,采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化,是一种包括液相和固相物理萃取过程;也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物质,再选用适当强度溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质,从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质,而让被测物质流出;或同时吸附杂质和被测物质,再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。
固相萃取柱的操作方法介绍
一、反相萃取柱操作
从极性基体中提取非极性的样品
1、活化:以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润
2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱
3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/溶剂混合液)
4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容器
二、正相萃取柱操作
从非极性基体中提取极性的样品
1、活化:3-5毫升非极性溶剂淋洗萃取柱
2、清洗:以5毫升适当非极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱
3、洗脱:将被测样品,用1-5毫升极性溶剂分批洗脱至收集容器
三、离子交换萃取柱
提取带电荷的样品
1、活化:以3-5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱
2、上样:以较低的流速,使样品均匀通过萃取柱
3、清洗:5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱
4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升高离子强度的缓冲液洗脱至收集容器
如何选择固相萃取柱?
是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置,常见的固相萃取柱大都以聚乙烯为材料的***针筒型装置,该装置内装有两片以玻璃纤维为材料的塞片,两个塞片中间装填有一定量的色谱吸附剂(填料)。
选择固相萃取柱的关键除了要求的规格之外,决定分离性能的是它的填料。在选择萃取柱时,必须根据待检测样品的种类及其***性质选择合适的填料。固相萃取填料通常是色谱吸附剂,大致可以分为三大类,分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。
固相萃取柱——萃取技术的发展
固相萃取技术的发展在很大程度上是得益于相色谱(HPLC)填料技术的发展,因此,固相萃取技术与液相色谱技术有许多相同之处。例如,两者都是通过液体中的目标化合物在固体填料上进行的吸附及脱附达到分离的目的。因此,人们常常可以通过目标化合物在HPLC的行为来预测其在SPE柱上的行为,并以此作为建立固相萃取方法的基础。
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