做亲和柱时，使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同？

Sepharose 4B指4%的琼脂糖

Sepharose CL-4B指4%高度铰链的琼脂糖

他们的区别在于铰链程度不一样，在亲和层析色谱中，介质铰链程度越高，化学稳定性就应该越高。这样就可以耐受更加苛刻条件洗脱而偶联的配基不会脱落。越是硬质的介质，耐受的流速也会越高。这样更节省平衡洗脱的时间。

你对亲和柱了解多少？

亲和柱可以应对不同复杂的样品基质，实现样品中目标的有效回收，回收率总体保持理想。

亲和柱中含有特异性紧密附着在载体上，这些可以与样品中的特异性结合，保存在亲和柱中，进一步洗脱可以得到待检测的。适用于浓缩和纯化粮食、坚果或者牛奶等复杂基质中的样品的提纯。

主要应用于赭曲，呕吐和玉米赤等的提取和净化。

亲和柱适用注意事项

(1) 呕吐***对******，应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次酸钠浸泡过夜。

(2) 不要使用过有效期的亲和柱。

(3) 亲和柱应在2~8℃保存。不要冷冻。

(4) 使用前，亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。

(5) HPLC液相测定值、***盒计算值接近***高检出值时，样本的实际含量可能大于柱容量而造成流穿，建议减少上样体积重新过柱。

(6) 称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整，建议不少于10g样。