做亲和柱时,使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同?
Sepharose 4B指4%的琼脂糖
Sepharose CL-4B指4%高度铰链的琼脂糖
他们的区别在于铰链程度不一样,在亲和层析色谱中,介质铰链程度越高,化学稳定性就应该越高。这样就可以耐受更加苛刻条件洗脱而偶联的配基不会脱落。越是硬质的介质,耐受的流速也会越高。这样更节省平衡洗脱的时间。
亲和柱的特点及使用注意事项
特点:
?特异性强,柱容量大;
? 简单,方便,安全,环保。
注意事项:
1、2-8℃保存,使用前需要回温到室温24-28℃,较佳温度25℃。
2、复杂基质如高蛋白、高油脂、酸性样品可将提取液分两次提取提高提取效果。
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双酚A检测新方法——亲和柱净化-液相色谱法
双酚A,也称BPA,在工业上被用来合成聚碳酸酯(PC)和环氧树脂等材料。许多科学家发现,双酚A会发挥类似雌素的作用扰乱***内的代谢过程。。我国、欧盟、美国等都禁止其用于婴***奶瓶。但目前对于双酚A的检测前处理仅有少量文献报道,均采用简单的萃取、浓缩或SPE固相萃取柱净化。中检维康研发团队将专一性强、稳定性高的层析技术应用于双酚A检测,力图简化样品前处理,提高检测灵敏度及净化效果。
双酚A亲和柱能够特异性的纯化样品中的双酚A,将样品溶液通过亲和柱时,双酚A键合在亲和柱中的上。用蒸馏水将杂质淋洗去除。将净化、浓缩后的双酚A从上分离下来。然后,注入HPLC或LC-MS进行测定。
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