你对亲和柱了解多少?
亲和柱可以应对不同复杂的样品基质,实现样品中目标的有效回收,回收率总体保持理想。
亲和柱中含有特异性紧密附着在载体上,这些可以与样品中的特异性结合,保存在亲和柱中,进一步洗脱可以得到待检测的。适用于浓缩和纯化粮食、坚果或者牛奶等复杂基质中的样品的提纯。
主要应用于赭曲,呕吐和玉米赤等的提取和净化。
亲和柱——产品优点
1. 方法安全简单,结果准确可靠,且技术高超,得到多家部门认证。
2. 种类齐全,分别开发了***、呕吐、伏马、玉米赤霉烯酮、T-2及橘青***的亲和柱及分析方法。
3. 获得的标准编号多:AOAC/FGIS/GB/中国药典等国际国内几十项标准。
4. 国内外用户广泛:90%以上均采用该方法分析***,VICAM技术在全世界110个***和地区得到了广泛的应用;更是中国用户的必选。
亲和柱——亲和层析的应用
抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从中分离其对应的。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物后制备,将与适当基质偶联形成亲和吸附剂,就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、间亲和力一般比较强,其解离常数为108-10?12M,所以洗脱时是比较困难的,通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力,以便于洗脱。
另外金***球菌蛋白A(ProteinA)能够与球蛋白G(IgG)结合,可以用于分离各种IgG。
亲和柱——亲和层析介绍
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。
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