ELISA***盒的操作方法——间接法
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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二(抗)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.然后用DDW洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
ELISA***盒——会出现的问题及解决办法
1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:***盒内容物未能充分回。
解决办法:确定***盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用***盒的清洗液清洗。
解决办法: 请用***盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:***盒已过有效期限。
解决办法:请更换成仍在有效期限内的***盒。
Elisa***盒的优点
1.特异性强:不与其它细胞反应。
2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。
3.稳定性高:实验效果很稳定。
4.超灵敏度:***小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
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ELISA***盒-ELISA检测原理介绍
酶联吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)指将可溶性的抗原或结合到聚乙烯等固相载体上,利用抗原结合专一性进行反应的定性和定量检测方法。它是应用比较多的一种酶技术。ELISA***盒(ELISAKits)已成为***和植物病理学研究中的常用诊断工具,是检测***提取液和细胞培养液中目标/抗原的理想工具,也是重要的质量控制手段。
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