固相萃取柱规格介绍
常见的固相萃取柱大都以PP为材料的***针筒型装置,该装置内装有两片以聚乙烯(PE)或玻璃纤维为材料的塞片,两个塞片中间装填有一定量的色谱吸附剂(填料)。固相萃取柱上端敞开,下端为出液口,液体经过吸附剂后从出口排出。根据经典固相萃取柱填料上方的空间体积,固相萃取柱的规格可分为1 mL、3 mL、6 mL、10 mL、15 mL、20 mL、30 mL、60 mL等等。也有根据具体应用要求而生产的特殊规格的固相萃取柱。从固相萃取柱的外观看,经典的固相萃取柱与***针筒相近,是直筒型的。另外一种固相萃取柱上端是漏斗形,便于在手动操作时一次性载入较多的样品。
正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱
固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。
使用固相萃取柱时应注意的影响因素
溶剂的选择
在固相萃取中,萃取固定相的活化、上样富集、淋洗杂质、分析物洗脱的过程中,都涉及溶剂的选择问题。溶剂选择重要的是溶剂强度,这是保证固相萃取成功的关键表2给出了常见正相型和反相型固相萃取中溶剂的极性和强度大小关系。
对于固定相活化溶剂,一般先使用强的溶剂去除固定相上的杂质,然后选择与上样溶剂强度一致的活化溶剂,以保证样品能够在固定相上充分保留。需注意的是,固定相在活化过程和活化结束后都要保持湿润,否则会使固定相干裂或者进入气泡,导致柱效降低、回收率降低以及重现性变差。
对于上样溶剂的选择,要尽可能选择弱强度的溶剂,保证样品能够充分地保留在固相萃取柱上,还可以采用大量上样方法,提高富集倍数。如果上样溶剂强度过高,样品不能保留或者弱保留,则回收率低。
对于洗脱溶剂,要选择溶剂强度比较大的,保证保留在固定相上的样品洗脱下来,对大多数化合物来说,是一种比甲、乙醇更好的洗脱溶剂。另外,选择的洗脱溶剂要与后续的分析条件相适应。还有就是要选择黏度小、纯度高、毒性小并且不与样品和固定相发生反应以及不会干扰样品后续检测的溶剂。如果单一的洗脱溶剂效果不理想,也可考虑使用混合溶剂进行洗脱。
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