什么是***盒?
ELISA***盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测***盒、ELISA Kit、酶联***盒、酶联吸附测定***盒、酶联分析***盒、酶免***盒等,比较常见的叫法是ELISA检测***盒、酶联吸附测定***盒等。
ELISA***盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
ELISA***盒的应用技术
ELISA检测***盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入***溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa***盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
ELISA***盒——会出现的问题及解决办法
1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:***盒内容物未能充分回。
解决办法:确定***盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用***盒的清洗液清洗。
解决办法: 请用***盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:***盒已过有效期限。
解决办法:请更换成仍在有效期限内的***盒。
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