固相萃取柱的填料和容量

固相萃取填料通常是色谱吸附剂，可分为三大类：一类是以硅胶为基质（例如C18、C8等）；第二类是以高聚物为基质，例如聚乙烯-二乙烯苯等；第三类是以无机材料为主的，例如弗罗里硅藻土、氧化铝、石墨化碳等。

在选择固相萃取柱时，必须考虑柱容量。由于我们面对的样品基质通常都较为复杂，例如食品、生物样品等等。在固相萃取中，固相萃取吸附剂对目标化合物吸附的同时，也会吸附同类性质的杂质。因此，在考虑柱容量是应该是目标化合物加上可被吸附的杂质总量不能超过柱容量。否则在载样的过程中就可能有部分目标化合物不能被吸附，造成回收率偏低。

固相萃取柱的操作方法介绍

一、反相萃取柱操作

从极性基体中提取非极性的样品

1、活化:以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润

2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱

3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/溶剂混合液)

4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容器

二、正相萃取柱操作

从非极性基体中提取极性的样品

1、活化:3-5毫升非极性溶剂淋洗萃取柱

2、清洗:以5毫升适当非极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱

3、洗脱:将被测样品,用1-5毫升极性溶剂分批洗脱至收集容器

三、离子交换萃取柱

提取带电荷的样品

1、活化:以3-5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱

2、上样:以较低的流速,使样品均匀通过萃取柱

3、清洗:5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱

4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升高离子强度的缓冲液洗脱至收集容器

固相萃取柱淋洗系统怎么选择

固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基质和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离或者富集目标化合物的目的。固相萃取实际上采用的是液相色谱的分离原理,分离模式主要包括反相、正相、离子交换和吸附。固相萃取所用的吸附剂与液相色谱常用的固定相相同,只是在填料的形状和粒径上有所区别。一般来讲,固相萃取填料的粒径分布较液相色谱柱中的要宽,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。
　　固相萃取小柱的吸附剂通常装填于聚烯柱筒底部,并由上下两层聚烯或聚四氟乙烯筛板固定;也有96 孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小规格、吸附剂的种类及装量都配有多种选择。

固相萃取柱使用的基本步骤

1.预洗

预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。

2.活化

首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。

3.上样

选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。

4.冲洗

用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。

5.淋洗

用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。