亲和柱亲和层析的基本原理

亲和层析是一种吸附层析，抗原（或）和相应的（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。

所以将抗原（或）固相化后，就可以使存在液相中的相应（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有有效、快速、简便等优点。

亲和柱——亲和层析的用途

简单来说，亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。

亲和层析常见的用途是纯化重组蛋白。亲和层析是从粗混合物中纯化蛋白质或核酸的较佳选择。如果蛋白质的分子量，疏水性，电荷等未知，亲和色谱法仍可适用于这种情况。一个典型例子是尝试分离具有特定活性的酶时，可以用与所选底物相似或相同的连接配体构建亲和柱。

亲和柱——亲和层析介绍

将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开，然后选用适当的洗脱液，改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来，这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。