低温生物的脱水存法
③ 石蜡油封存法,在斜面培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
唤醒盛水的低温生物
目前,保藏中心保存有各类微生物资源5700种、50000余株,用于程序的生物材料有1万余株。那么,数目庞大的微生物资源,从“清醒”到被“沉睡”经历了什么?
“首***行存活度和纯度检测,然后用***测定来核实的正确性,继而用真空冷冻干燥法或液氮超低温***法保存。”保藏时一般两种方法会互为备份,使用液氮法保存6份,真空法则要备份12个。
“通过冷冻技术处理后,***就会处于休眠状态。如果要活化使用,则需通过相应的培养液进行活化,才能***活性。”以格氏嗜盐碱为例说,复活所需的营养为:20%的氯化钠,酪蛋白、氨基酸、pH值为9等,在适宜的温度和培养基中,这些沉睡的***便会被重新唤醒。
低温生物的筛选
对水中氮的有机物去除起主要作用的是氨化***、硝化***和反硝化***,它们适宜温度多为30~35℃,但是对于北方寒冷地区来说,偏低的水温明显不利于普通氨化***、硝化***和反硝化***发挥其对氮素有机物的去除作用。因此,筛选适用于北方寒冷地区的低温氨化***、硝化***和反硝化***对于北方地区的污水处理有着现实意义。本文提出了一种筛选低温氨化***、硝化***和反硝化***的方法:在15~18℃进行氨化***、硝化***和反硝化***的富集、的分离纯化、初筛、作用效果的测定。通过此一系列步骤从培养基中分离出氨化***、硝化***和反硝化***各6株。
低温生物的复壮措施
① 纯种分离。采用平板划线分离法、稀释平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型优良性状的单细胞分离出来,经扩大培养***原菌株的典型优良性状,若能进行性能测定则更好。还可用显微镜操纵器将生长良好的单细胞或单孢子分离出来,经培养***原菌株性状。
② 通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮)。主要是对一些寄生性的菌株,可以将衰的菌株接种到相应的宿主体内,提高其寄生性能及其它性能。
③ 淘汰已衰的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀生命力较差的已衰个体)。可以采用各种外界不良理化条件,使发生衰的个体死去,从而留下群体中生长健壮的个体.如:对'5406'抗生菌的分生孢子进行-30-10度的低温处理5-7天,使80%死去,在抗低温个体中可找到健壮的个体.
④ 采用有效的保藏方法。
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