低温生物的影响因素有哪些

菌的质量：保藏的应培养在营养丰富的条件下，使之进入稳定期，稍老一些的菌体对环境抵抗力强。另处，作为冷冻干燥的菌悬液细胞浓度要高不同的菌对冷冻干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液细胞浓度不高，就会使以后传种造成困难，保存期也会受到影响。

保护剂：不同种类的保护剂对不同微生物的作用是不同的，如个别在脱脂乳作保护剂的情况下失败率高达99.99%，而采用葡聚糖等混和保护剂时失败率大大减少。一般情况下，那些容易保存的对保护剂的要求不很严格，而不易保存的对保护剂的要求却很苛刻。因此，选择好的保护剂是冷冻干燥保存的关键因素。

干燥速度：实验表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率为67.3%，而3h为59%。

空气的影响：冷冻干燥后空气对***细胞影响较大，可导致细胞损伤进而失败，故在冻干后应立即在真空下融封，才有利于长期保存。

温度的影响：在干燥和真空状况下温度的影响远没有上述几项因素重要，因此可以在室温下保存，但许多微生物在4℃保存的存活率要比在室温下高1倍。

含水量的影响：水分含量过高对菌存活不利，完全脱水也不利于保存，一般把干燥后的细胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

                                                                什么是低温生物的保藏？

将需要保藏的，接种在适宜的斜面培养基上，菌丝长满斜面时，用***纸包扎棉塞或者硅胶塞，放置在4℃的冰箱中保藏，叫做斜面（）低温保藏法。由于微生物的新陈代谢活动未停止，试管内培养基易失水变干。因此，保藏时间较短，不适于长期保藏。每隔3～6个月应转管一次。草菇不耐低温，需保藏在10～12℃之间。或在草菇菌落上灌注3～4毫升的防冻剂（10%的甘油）。当菌丝长满斜面后，在无菌条件下，用无菌橡皮塞代替棉塞，并用石蜡密封，即可在室温或冰箱中保藏。这种方法可防止杂菌污染，隔绝氧气，避免培养基干燥，使用方便。据测定，保藏3年的生活力仍很旺盛。

低温生物的复壮措施

① 纯种分离。采用平板划线分离法、稀释平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型优良性状的单细胞分离出来，经扩大培养***原菌株的典型优良性状，若能进行性能测定则更好。还可用显微镜操纵器将生长良好的单细胞或单孢子分离出来，经培养***原菌株性状。

② 通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮)。主要是对一些寄生性的菌株，可以将衰的菌株接种到相应的宿主体内，提高其寄生性能及其它性能。

③ 淘汰已衰的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀生命力较差的已衰个体)。可以采用各种外界不良理化条件,使发生衰的个体死去,从而留下群体中生长健壮的个体.如:对'5406'抗生菌的分生孢子进行-30-10度的低温处理5-7天,使80%死去,在抗低温个体中可找到健壮的个体.

④ 采用有效的保藏方法。