低温生物的筛选分离

筛选：工业发酵的有用，其筛选步骤包括分离、初筛和复筛，挑选具有某种能力的有用。

分离：首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品，用无菌水稀释后，涂布于置有适宜***、霉菌生长的琼脂培养基平皿上，并将其倒置于恒温箱中，培养一定时间，平皿上长出的许多单个菌落（单一微生物的集落）经分别分离后即为各种纯种菌株，简称纯种，移种至试管斜面培养基上，置4℃冰箱备用。

筛选模型：根据不同的筛选目的，采用不同的筛选模型。如常规筛选的方法是将土壤中分离所得的纯种，在含有琼脂培养基的平皿上培养后，用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上，在适宜的温度下培养一定时间后取出，如在菌块的周围有透明的抑菌圈，则表明此具有产生***试验菌生长的物质的能力。所得经过摇瓶液体发酵，测定发酵液或菌丝体内的含量，选出生产能力高的。另一方面对所提取的进行结构分析、药理试验及临床试验等，确为有效者，即可作为生产。又如筛选脂肪酶生产的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上，恒温培养一定时间，如菌落周围出现透明圈的，则该菌具有分解脂肪的能力，进一步作摇瓶发酵测定酶活力，挑选产量高者作生产的出发菌株。

低温生物的作用

从18年开始，就对北京顺义马坡工业区污水厂（日处理2000吨））进行微生物改良，经改良后，马坡污水厂各项出水指标均低于北京排放标准，一直平稳运行，被顺义环保局评为污水站。18年又连续对河北承德日处理5万吨的污水厂和辽宁长岭县日处理2万吨的污水厂进行微生物改良，都取得了非常好的改良效果，冬季低温氨氮指标一直持续稳定达标，平稳运行，没有二次再补充过耐低温生物。

低温生物的复壮措施

① 纯种分离。采用平板划线分离法、稀释平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型优良性状的单细胞分离出来，经扩大培养***原菌株的典型优良性状，若能进行性能测定则更好。还可用显微镜操纵器将生长良好的单细胞或单孢子分离出来，经培养***原菌株性状。

② 通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮)。主要是对一些寄生性的菌株，可以将衰的菌株接种到相应的宿主体内，提高其寄生性能及其它性能。

③ 淘汰已衰的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀生命力较差的已衰个体)。可以采用各种外界不良理化条件,使发生衰的个体死去,从而留下群体中生长健壮的个体.如:对'5406'抗生菌的分生孢子进行-30-10度的低温处理5-7天,使80%死去,在抗低温个体中可找到健壮的个体.

④ 采用有效的保藏方法。

低温生物***发酵

1)生物有机肥完全腐熟，虫卵死率达到97%以上;农家肥堆放简单，虫卵死率低。

2)生物有机肥无臭;农家肥有恶臭。

3)生物有机肥施用方便，均匀;农家肥施用不方便，肥料施用不均匀。

4 生物有机肥与生物菌肥的区别:

1)生物有机肥价格便宜，每吨在800元左右;生物菌肥价格昂贵，每吨上万元。

2)生物有机肥含有功能菌和有机质，能改良土壤促进被土壤固定养分的释放;生物菌肥只含有功能菌，通过功能菌来促进土壤固定肥料的利用。

3)生物有机肥的有机质本身就是功能菌生活的环境，施入土壤后容易存活;而生物菌肥的功能菌可能不适合有的土壤环境