低温生物***的影响力

东北地区一年大约有6个月的寒冷期。因此，在污水厂的建设过程中，往往把气温相对较高的季节用于污水处理厂的土建。土建完工后，基本上就进入了东北地区的低温期。目前我国城市污水处理厂启动与调试面临的主要困难是进水有机物浓度低以及低温造成的微生物增殖缓慢。绝大多数的污水处理厂的建设完工后，都需要2~4个月的时间才能基本完成污水生化处理工艺的启动，某些污水处理厂生化处理工艺的启动甚至要从头年的10月份或11月份持续到来年气温回升的4月份或5月份，因而极大地影响了污水处理厂正常的商业运行。

                                                      低温生物的保藏法你了解多少？

保藏可按微生物各分支学科的***性质分为普通﹑工业﹑农业﹑***﹑兽医﹑等保藏管理中心。此外﹐也可按微生物类群进行分工﹐如沙门氏菌﹑弧菌﹑根瘤菌﹑乳酸菌﹑酵母菌﹑丝状***﹑藻类等保藏中心。

世界上约有 550个保藏机构。其中有美国典型保藏中心(简称ATCC﹐马里兰)﹕1925年建立﹐是世界上大的﹑保存微生物种类和数量多的机构﹐保存病毒﹑衣原体﹑***﹑酵母菌﹑***﹑藻类﹑原生动物等约 29000株﹐都是典型株﹔荷兰***保藏中心(简称CBS﹐得福特):1904年建立﹐保存酵母菌﹑丝状***约 8400种﹑18000株﹐大多是模式株﹔英国***保藏中心(简称NCTC﹐伦敦)﹕保存兽用病原微生物约2740株﹔英联邦***研究所(简称CMI﹐萨里郡)﹕保存***模式株﹑生理生化和有机合成等2763种﹐8000株﹔日本大阪发酵研究所(简称IFO﹐大阪):保存普通和工业微生物约9000株﹔美国相关部北方利用研究开发部(北方地区研究室﹐简称NRRL﹐伊利诺伊州皮契里亚)﹕收藏农业﹑工业﹑微生物分类学所涉及的﹐包括***5000株﹐丝状***1700株﹑酵母菌6000。

                                                           低温生物对沙土有什么要求？

1 沙土管制备
将河沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，放入容器中用10%盐酸浸泡，如河沙中有机物较多可用20%盐酸浸泡。24小时后倒去盐酸，用水洗泡数次至中性，将沙子烘干或晒干。另取地面下40～60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土，研碎，100目过筛,水洗至中性，烘干。将处理后的沙、土按质量比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中，高度为1cm左右，塞好棉塞，121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支，无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中，30℃培养24小时，检查无微生物生长后方可使用。
      2 斜面培养物的制备
      参照定期移植法。
      3 制备菌悬液
     向培养好的斜面培养物中注入3～5mL无菌水，洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液，均匀滴入沙土管中，每管0.2～0.5mL。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
      4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
      5 保藏
      将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4～6℃)干燥处保藏，每隔半年检查一次存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好，置干燥器内保存。
保藏时间2～10年。
     6 ***培养
     无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。

低温生物的沙土宝藏法

(1)选择培养成熟的(一般指孢子层生长丰满的，营养细胞用此法效果不好)优良，以无菌水洗下，制成孢子悬液。

(2)于每支沙土管中加入约0.5ml(一般以刚刚使沙土润湿为宜)孢子悬液，以接种针拌匀。

(3)放入真空干燥器内，用真空泵抽干水分，抽干时间越短越好，务使在12小时内抽干。

(4)每10支抽取一支，用接种环取出少数沙粒，接种于斜面培养基上，进行培养，观察生长情况和有无杂菌生长，如出现杂菌或菌落数很少或根本不长，则说明制作的沙土管有问题，尚须进一步抽样检查。

(5)若经检查没有问题，用火焰熔封管口，放冰箱或室内干燥处保存。每半年检查一次活力和杂菌情况。

(6)需要使用，复活培养时，取沙土少许移入液体培养基内，置温箱中培养。

此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、，因此在工业生产中应用广，效果亦好，可保存2年左右，但应用于营养细胞效果不佳。