样品预处理
在待测样品中,DNA或RNA通常都是被蛋白包裹缠绕,根据不同的细胞和***样品的应用,可选择合适的预处理方法将靶核酸暴露:
内源性酶灭活:如果探针的检测是通过酶促法进行的,则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的POD可通过含1%H2O2的甲醛溶液处理30min。如果检测酶为AP,可在底物溶液中加入左旋咪唑,AP检测的内源性背景一般来说比POD检测的低得多,因为在杂交过程中,样品中内源性AP酶的活性基本都丧失了。
RNase处理:在DNA-DNA杂交实验中,RNase的处理可去除内源性RNA,增加实验的信噪比。在进行mRNA为靶标的检测时,RNase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将DNase-free的RNase溶解于2×***(100μg/ml),样品在溶液中37℃处理60min。
技术应用:
利用动物模型,科研工作者可以从细胞和分子水平研究的发生和发展过程,对于了解的发病机制和转移机制有重要作用,因此,模型可以作为实验假说和临床假说的实验基础,能为的病因学、发展过程和提供特有的条件。
实验流程:
模型按照建立的方法及研究目的的不同可分为***修饰小鼠模型、自发和诱发小鼠模型和移植小鼠模型,本公司可以根据需求提供适于客户研究所必需的模型。
1、致模因素对动物模型的影响
应明确研究目的,清楚相应人类***的发生、临床症状和发病机制,熟悉致病因素对动物所产生的临床症状和发病情况,致病因素的剂量。
2、动物因素对动物模型的影响
品种、品系、年龄体重、性别、生理状态等
3、实验技术因素对动物模型的影响
实验季节、昼夜过程、深度、***技巧、实验给药、对照组的影响等。
4、环境因素和营养因素对动物模型的影响
模型的成败往往与环境的改变有密切关系。拥挤、饮食改变、过度光照、噪音、屏障系统的***等,任何一项被忽视都可能给模型动物带来严重影响。
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