(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分钟振荡一次;
(4)去掉上清,加入终止液终止消化,吹打10-15次,不能有气泡,收集上清,剩余***再消化一次。
(5)4℃1000rpm离心10min,弃上清,加入种植液1重悬,培养箱内差速贴壁30min;
(6)收集上清,台盼蓝染色计数,按6*105cells/孔种入六孔板(种植液1),37℃,5%CO2,95%饱和湿度的培养箱中培养;
(7)培养第二天,全换液更换为种植液2;
(8)培养第四天,半量换液加入5uM的,24h全量换液;
(9)之后每周换液两次。
简单的说就是用各种动物当做实验的模型对象,来模拟人做科学研究的。比如说我们上学的时候都用过青蛙做实验,也有用鱼或者蚯蚓还有猫的,这些就是简单的一种造模了,通常来说在实验室里面用到的比较多的实验动物就是小白鼠了,这个我们大家都是有了解的。
用途有哪些 :
运用这种模技术的实验内容也是非常多的,具体的可以根据你要研究的不同科研项目来定,比如说你想实验一种因素如果作用在人类的身上会有什么影响或者造成什么效果的话,就可以先把这个因素作用在你要实验的动物身上,先观察一下具体反应,做好相关的实验记录,后在实验周期结束以后再观察一下实验动物的具体结果就可以了。比如说我们都知道小脑是支配我们***平衡能力的一个**系统,如果想实验这个理论的话,就可以用大头针对实验动物进行硬脑模穿刺,这样就可以摧毁动物的一侧小脑,等小脑被摧毁以后,你就可以看到实验的动物对象已经不能够维持基本的平衡了,会在桌子上不停的滚动,这个过程就是一个基本简单的实验动物造模。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性Wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内***,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周***2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维***中有I型胶原的mRNA增多。
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