样品预处理
在待测样品中,DNA或RNA通常都是被蛋白包裹缠绕,根据不同的细胞和***样品的应用,可选择合适的预处理方法将靶核酸暴露:
内源性酶灭活:如果探针的检测是通过酶促法进行的,则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的POD可通过含1%H2O2的甲醛溶液处理30min。如果检测酶为AP,可在底物溶液中加入左旋咪唑,AP检测的内源性背景一般来说比POD检测的低得多,因为在杂交过程中,样品中内源性AP酶的活性基本都丧失了。
RNase处理:在DNA-DNA杂交实验中,RNase的处理可去除内源性RNA,增加实验的信噪比。在进行mRNA为靶标的检测时,RNase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将DNase-free的RNase溶解于2×***(100μg/ml),样品在溶液中37℃处理60min。
简单的说就是用各种动物当做实验的模型对象,来模拟人做科学研究的。比如说我们上学的时候都用过青蛙做实验,也有用鱼或者蚯蚓还有猫的,这些就是简单的一种造模了,通常来说在实验室里面用到的比较多的实验动物就是小白鼠了,这个我们大家都是有了解的。
用途有哪些 :
运用这种模技术的实验内容也是非常多的,具体的可以根据你要研究的不同科研项目来定,比如说你想实验一种因素如果作用在人类的身上会有什么影响或者造成什么效果的话,就可以先把这个因素作用在你要实验的动物身上,先观察一下具体反应,做好相关的实验记录,后在实验周期结束以后再观察一下实验动物的具体结果就可以了。比如说我们都知道小脑是支配我们***平衡能力的一个**系统,如果想实验这个理论的话,就可以用大头针对实验动物进行硬脑模穿刺,这样就可以摧毁动物的一侧小脑,等小脑被摧毁以后,你就可以看到实验的动物对象已经不能够维持基本的平衡了,会在桌子上不停的滚动,这个过程就是一个基本简单的实验动物造模。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性Wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内***,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周***2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维***中有I型胶原的mRNA增多。
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