***=150mMN***,15mM柠檬酸钠溶液(pH7.4)

　　HCl处理：对样本进行20-30min的200mMHCl处理，可将蛋白抽提，并将核酸序列进行一定程度的水解，增加杂交检测的信噪比。

　　去垢剂处理：如果对样品的固定、脱水、包埋等预处理过程不足以将脂膜成分***暴露核酸，可对样品进行额外的蛋白去垢剂处理(如TritonX-100和SDS)。

　　蛋白酶处理：样品中待杂交的核酸序列常与蛋白缠绕交联在一起，样品的固定步骤更是加剧了蛋白的交联程度，因此预渗透是核酸杂交前的常规步骤，通常通过蛋白酶K的消化作用来完成。根据不同的文献来源，蛋白酶K的工作浓度通常设为10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMC***2,pH7.4,酶浓度可根据具体样品进一步优化)，对样品进行37°C7.5–30min的处理。染色体涂片或核片的蛋白酶K处理浓度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文献指出，固定石蜡包埋的***切片样品，使用胃蛋白酶（500μg/ml，溶于200mMHCl）将得到较好的蛋白消化结果。

　有关动物实验室检测的要求及标准

　　动物实验室又叫动物房，是指适宜于饲养、繁育实验动物的建筑物。这类建筑应具有特定的环境要求和实验手段，以保证动物的品质和实验研究的准确可靠性。建设动物实验室时有着不一样的要求及标准，今天咱们主要来看看动物实验室建设的标准有哪些？

　　1．SPF级动物实验室：

　　SPF及动物实验室符合动物居住的要求，严格控制人员、物品和空气的进出，适用于饲育清洁级或无特定病原体级实验动物。经过的监测中心检测，通过现场验收的屏障环境，才可以作为清洁级或SPF级动物的饲养环境。

　　2．实验室动物房|动物实验室|动物研究室分类及标准：

　　实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。

肝纤维化动物模型法：

180～200g Wistar或SD大鼠，皮射40%-50%CCl4，油溶液(0.3ml/100g)，每周2次，第2周 始，隔日以20％-30％酒精lml灌胃(或作为饮料)，饲以单纯玉米面(混以0.5％胆固醇)，共10周。

评价：第2周出现小叶中心小片状肝细胞变性坏死， 第4周开始有较薄的纤维间隔形成，第6周间隔进一步增厚，有假小叶形成：第8周形成厚的纤维间隔，分割形成假小叶。大鼠成活率60%-80%。

该模型是目前国内外常采用的动物模型，可靠且时间短，肝纤维化进展稳定，适合于过程的动态研究。