常用检测技术
***病理学检测技术
实验室的检测人员可应用***的病理学以及学的相关技术和知识,对动物染病的部分***开展切片研究。
学检测技术
实验室检测人员应用学检测技术检测动物体内抗原和特异性状。
分子生物学检测技术
实验室检测人员通过应用生物学技术对动物***病毒的***进行科学诊断,同时***研究动物体内病原体***的变异状况。
以上就是动物实验检测技术在动物疫病防控中的作用!
***=150mMN***,15mM柠檬酸钠溶液(pH7.4)
HCl处理:对样本进行20-30min的200mMHCl处理,可将蛋白抽提,并将核酸序列进行一定程度的水解,增加杂交检测的信噪比。
去垢剂处理:如果对样品的固定、脱水、包埋等预处理过程不足以将脂膜成分***暴露核酸,可对样品进行额外的蛋白去垢剂处理(如TritonX-100和SDS)。
蛋白酶处理:样品中待杂交的核酸序列常与蛋白缠绕交联在一起,样品的固定步骤更是加剧了蛋白的交联程度,因此预渗透是核酸杂交前的常规步骤,通常通过蛋白酶K的消化作用来完成。根据不同的文献来源,蛋白酶K的工作浓度通常设为10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMC***2,pH7.4,酶浓度可根据具体样品进一步优化),对样品进行37°C7.5–30min的处理。染色体涂片或核片的蛋白酶K处理浓度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文献指出,固定石蜡包埋的***切片样品,使用胃蛋白酶(500μg/ml,溶于200mMHCl)将得到较好的蛋白消化结果。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性Wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内***,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周***2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维***中有I型胶原的mRNA增多。
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