***元原代培养是将胚胎哺乳动物***系统的部分***，如大脑皮层、海马、脊髓等脑***直接取出，再接种培养的方法。目前国内、外有关***元培养的方法较多，但在原代培养中***元的纯度和产量方面还存在一些急待解决的问题。由于***元是一种高度分化的细胞，相对于其它细胞而言，***元在体外更难以存活和生长。因此，体外培养***元要求的培养方法和营养条件均较为特殊。

***细胞的体外培养技术是研究***源性***的发病机制、进程的一个重要工具，能很好的、直观的反映离体***元的发育状况和生理活性，如何建立一个稳定成熟的***细胞培养体系是***系统***体外实验研究顺利进行的基础。随着基础***及临床***研究的逐渐深入，***细胞的体外培养技术在脑损伤、******、***相关******方面得到广泛重视和普及应用。

原位杂交过程

　　杂交前可进行预杂交，以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同，只是预杂交液中不含探针和***葡聚糖。

　　靶DNA的变性（对mRNA的原位杂交无需此步）

　　样品DNA的变性在DNA-DNA杂交检测中是必须的步骤，但同时可能会造成样品形态学的部分***，此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性，实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。

　　如使用热变性方法，可在杂交时将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性，染色体DNA样品处理2min，后冷却至37℃进行杂交。***样品DNA的变性时间可增加至80℃10min。

肝纤维化动物模型化学性损伤法：

雄性Wistar大鼠，体重130g左右，用腹腔内***，次20mg/100g体重，从第二次起12mg/100g体重，每周***2次，共8周。

评价:第3周，在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润，炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束，纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维***中有I型胶原的mRNA增多。