动物实验检测的取材要求介绍：

　　实验小鼠取材要求

　　采血后，立即将血液放入1.5mL离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让血液在室温下静置30-60分钟。在相对离心力（relativecentrifugalforce，RCF）14000g下离心血样10-15分钟，用移液管吸取分离，并转移到干净的离心管中。可将样本在14000g下再离心2-3分钟，以分离任何剩余的红细胞。将分离好的转移到干净的离心管中。

(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；

(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余***再消化一次。

(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；

(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；

(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；

(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；

(9)之后每周换液两次。

动物实验发展的目的，就是要通过对动物本身生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类的生命奥秘，控制人类的***和***，延长人类的寿命。随着***生物科学的突飞猛进发展，认识到公害问题不仅已成为粮食、人口、老年人等的重大社会问题，而且还涉及到地球上生活着的动物生存问题，例如产业公害、食品公害、***毒性等，均直接影响***健康，对这些问题的研究，必然要通过动物实验(包括动物***模型的开发等)来阐明解决。因此，实验动物科学，特别是实验动物的重要性愈来愈被人们所认识，它已被认为是人类追求幸福生活的支柱，故实验动物科学亦被称之为生命科学;为此，******对实验动物科学的发展，均给给予高度的重视，其投入的经济物资和技术力量，几乎可同发展原子能科学相提并论，其重要意义可想而知。

肝纤维化动物模型造模方法：

1.法：

性肝纤维化产生的机理是Ⅲ型反应引起，白蛋白和的大分子物质，作为异种抗原进入大鼠体内后，刺激其产生相应的，当抗原再次进人机体后抗原结合，形成抗原—复合物(IC)，抗原的反复、长期刺激，过量的复合物来不及被清除，沉积于的血管壁内外，引起血管炎，造成肝损伤。反复导致肝细胞变性、坏死，再生，纤维等变化，后发展为肝纤维化、。

动物选用雄性Wistar大鼠，体重130g左右。取猪0.5ml，腹腔内***，每周2次，共8次(猪的制备：取新鲜猪血，离心制，滤过，分装放低温冰箱备用)。

评价:

大鼠第3周出现肝细胞变性、坏死，第4周的胶原纤维形成纤维束，从***静脉到门管区之间相互伸延，发生纤维化。